论著
杨乐, 陈滢, 吴俞衡, 石妍, 齐朝阳, 孔祥仕, 马温华
录用日期: 2023-08-21
本文探讨 DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒在案件中应用的可行性。应用 DNATyper mtDNA-SNP60TM试剂盒对 100 个汉族无关个体和 20 组全同胞进行 mtDNA SNP 检验;取 25 pg/μL 马、牛、羊、猪、鸡、鸭、猫、狗、兔、鼠和大肠杆菌的 DNA 样品进行种属特异性测试;取 5、10、20、40 μmol/L 血红素进行抗抑制性测试;取两个批次的 DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒经反复冻融 10 次后进行稳定性测试;分别应用 VeriFiler TM Plus PCR 扩增试剂盒和 DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒对 100 份陈旧、腐败、降解检材进行检验。结果表明,100个汉族无关个体均获得清晰的 mtDNA SNP 分型结果,其检验结果与通过 mtDNA 测序获得的结果完全一致;100 个汉族无关个体含有 100 种不同的单倍型,20 组全同胞中每组个体之间 mtDNA SNP 分型结果相同;DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒对马、牛、羊、猪、鸡、鸭、猫、狗、兔、鼠和大肠杆菌的 DNA 样品进行检测,均未出现特异性分型,表明该试剂盒具有较好的种属特异性;当血红素浓度≤40 μmol/L 时,所有 mtDNA SNP 位点均获得正确分型,表明该试剂盒具有一定的抗血红素能力;两个批次的 DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒经反
复冻融 10 次后,所有 mtDNA SNP 位点均可正确分型,表明该试剂盒具有较好的稳定性;对于 100 份陈旧、腐败、降解检材,STR 检出率为 55%,mtDNA SNP 的检出率为 86%,mtDNA SNP 的检出率显著高于 STR。当模板 DNA 浓度大于 5 pg/μL 时,DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒能得到完整的分型谱图。综上,DNATyper mtDNA-SNP60 TM 试剂盒可应用于陈旧、腐败、降解检材的检验,具有很好的实战应用价值。