Online available: 2025-10-22
本文旨在评估微单倍型(microhaplotype, MH)–二代测序(next generation sequencing, NGS)结合概率基因分型(probabilistic genotyping, PG)方法在法医混合 DNA 样本分析中的应用效能,并与短串联重复序列(short tandemrepeat, STR)-毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)图谱结合 PG 分析流程进行比较。选取来自 4 起真实案件现场的 8 份混合样本和其对应的 9 个参考个体样本,分别采用 MHseq Typer47 混合 DNA 鉴定试剂盒和 VeriFiler™ PlusPCR 扩增试剂盒进行 MH-NGS 与 STR-CE 分型。随后,使用 SinoMixID 和 EuroForMix 两种 PG 体系对 STR-CE 图谱进行分析,并采用四川大学课题组自主开发的 MH 概率基因分型方法对 MH 测序数据进行分析,对不同体系下获得的似然比(likelihood ratio, LR)结果进行平行比较。结果显示:MH-NGS 数据无 Stutter 峰干扰,整体数据结构较STR-CE 图谱更为简洁清晰;MH 体系对混合样本中真实贡献者等位基因的完整检出率高于 STR;基于 MH 的 PG 分析在所有案件中均获得与实际情况相吻合的 LR 结果。在 83.3%(15/18)组对比分析中,MH 体系计算获得的支持或排除力度显著高于 STR 体系。由此得出结论:MH-NGS 体系结合 PG 方法可有效应用于法医现场混合 DNA 样本的分型与数据解释,具有良好的应用前景。