双波段激光仪（445 nm、532 nm, 英国Tech-Long公司）、睿鹰S31恒温恒湿熏显柜（德国Attestor Forensic公司）、202-0型台式恒温干燥箱（北京市永光明医疗仪器公司）、402AI型超声波雾化器（江苏鱼跃医疗设备股份有限公司）、尼康D750单反相机、567 nm长通滤光镜片、567 nm长通滤光眼镜。

茚三酮、茚二酮（芬格尔科技有限公司）, （对）-二甲（替）氨基肉桂醛（DMAC）试剂（上海化学试剂有限公司）, 乙酸、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚（60-90）（西陇科学股份有限公司）, 均为分析纯。

1.3.1 茚三酮试剂配制^[5]

将7 g茚三酮溶于10 mL甲醇中（水浴加热溶解）, 加入35 mL乙酸乙酯, 再加入5 mL冰乙酸, 然后加石油醚（沸点为60~90 ℃）至500 mL, 混合均匀后静置0.5 h取上清液备用。

1.3.2 茚二酮（IDO）试剂配制^[6]

将0.5 g茚二酮（以下称IDO）加入5 mL醋酸, 再加45 mL乙酸乙酯充分溶解后, 加入石油醚（沸点为60~90 ℃）至500 mL, 混合均匀后静置0.5 h取上清液备用。

1.3.3 DMAC显现纸制备^[7]

DMAC, 化学名为（对）-二甲（替）氨基肉桂醛, 属于生化试剂。称取0.5 gDMAC粉末溶解于200 mL无水乙醇（水浴加热）, 充分搅拌溶解即可; 将配制好的0.25% DMAC乙醇溶液倒入平底托盘, 将A3打印纸放入托盘中浸透, 取出晾干装入塑料袋中封口, 防止受潮, 放入冰箱冷藏备用, 200 mL溶液可以制作40张左右的显现纸。

实验者将双手清洗干净, 在室温条件下自由活动约2 h, 期间不触摸其他物品, 分别在维达牌卫生纸（四层卷筒纸）、怡飘竹本色纸（土黄色）、清风卷纸和维达面巾纸四种卫生纸上制作汗液手印实验样本, 每一种卫生纸上制作20个实验样本, 共计制作80个实验样本为一组, 制作五组。先将卫生纸沿中间折叠, 将每一枚样本指印按在折叠线上, 使折叠线将样本指印平均分开成两份, 制作完成后沿折叠线将按有指印的卫生纸裁剪开, 标记清楚每份实验样本, 在室温条件下放置约6 h等待显现。

2.2.1 茚三酮溶液和IDO溶液浸泡法

将第一组实验样本的一半平铺在干净的硬质铜版纸上用茚三酮溶液浸泡, 另一半平铺放在干净的硬质铜版纸上用IDO溶液浸泡, 浸泡阴干后分别放入恒温恒湿熏显柜中显现, 用茚三酮溶液浸泡的实验样本显现条件设为80 ℃、65 % RH, IDO溶液浸泡的实验样本显现条件设为100 ℃、60 % RH^[8], 显现时间均为15 min, 显现完成后将用IDO溶液浸泡显现的实验样本在暗室条件下置于532 nm激光下激发, 戴567 nm长通滤光眼镜, 同时在相机镜头前安装567 nm长通滤镜拍摄显现的效果, 将用茚三酮溶液显现的实验样本在自然光下观察并拍摄显现效果, 拍摄完成后用PS将同一枚样本的显现效果照片拼接在一起。从显现的效果来看两种显现方法均不理想, 纹线均发生了扩散, 但IDO的灵敏度略高于茚三酮, 显现效果比较如图1。

图1

Fig.1

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	图1 茚三酮溶液和IDO溶液浸泡法显现效果比较（a.维达卷筒纸; b.怡飘竹本纸; c.清风卷纸; d.维达面巾纸。各图左侧为IDO显现、右侧为茚三酮显现）Fig.1 Comparison between ninhydrin (right) and IDO (left) to develop latent fingerprint on different types of toilet paper (a. Vida roll paper; b. Yipiao bamboo paper; c. Qingfeng roll paper; d. Vida tissue paper)

2.2.2 IDO浸泡法和IDO超声雾化法

将第二组实验样本的一半放在干净的硬质铜版纸上用IDO溶液浸泡, 另一半放在超声波雾化器内用超声波雾化30 mL IDO显现溶液, 完成后标记清楚一同放入熏显柜内, 显现条件设置为100 ℃、60 % RH, 时间设置为15 min。显现完成后将实验样本均在暗室条件下置于532 nm激光下激发, 戴567 nm长通滤光眼镜, 同时在相机镜头前安装567 nm长通滤镜拍摄显现的效果。IDO超声雾化的显现效果好于IDO溶液浸泡的显现效果（图2）。

图2

Fig.2

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	图2 IDO浸泡法和超声雾化法显现效果比较（a.维达卷筒纸; b.怡飘竹本纸; c.清风卷纸; d.维达面巾纸。各图左侧为超声雾化显现、右侧为浸泡显现）Fig.2 Comparison between IDO soaking (right) and ultrasonic-atomized IDO vapor immersing (left) to develop fingerprint on different types of toilet paper (a-d. both the used toilet paper and order are same as those in Fig. 1)

2.2.3 IDO超声雾化法和DMAC显现纸冷熏显现

将第三组实验样本的一半采用超声雾化30 mL IDO显现液显现, 雾化完成后放入恒温恒湿熏显柜中, 设定显现条件为100 ℃、60 %RH, 显现时间设为15 min; 另一半检材放在制备好的两张DMAC显现纸中间, 在显现纸上放置书本等重物, 室温条件下放置48 h。由于DMAC在480~580 nm波段之间的激发荧光较强^[9], 本次实验中DMAC显现完成后将样本均在暗室条件下置于532 nm激光下激发, 戴567 nm长通滤光眼镜, 同时在相机镜头前安装567 nm长通滤镜拍摄显现的效果。IDO超声雾化的显现效果好于DMAC显现纸冷熏的显现效果（图3）。

图3

Fig.3

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	图3 IDO超声雾化显现法和DMAC显现法效果比较（a.维达卷筒纸; b. 怡飘竹本色纸; c.清风卷纸; d.维达面巾纸。各图左侧为IDO显现, 右侧为DMAC显现）Fig.3 Comparison between ultrasonic-atomized IDO vapor immersing (left) and DMAC paper exposing (right) to develop fingerprint on different types of toilet paper (a-d. both the used toilet paper and order are same as those in Fig. 1)

2.2.4 红外加热显现法和IDO超声雾化显现法

将第四组实验样本的一半采用超声雾化30 mL IDO溶液显现, 雾化完成后放入熏显柜中, 设定显现条件为100 ℃、60 %RH, 显现时间设为15 min; 另一半检材放在红外恒温加热干燥箱内, 温度200 ℃, 显现时间10 min。

显现完成后将实验样本均在暗室条件下置于532 nm激光下激发, 戴567 nm长通滤光眼镜, 同时在相机镜头前安装567 nm长通滤镜拍摄显现的效果。IDO超声雾化的显现效果好于红外加热显现效果（图4）。

图4

Fig.4

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	图4 红外加热显现法和IDO超声雾化法显现效果比较（a.维达卷筒纸; b.怡飘竹本色纸; c.清风卷纸; d.维达面巾纸。各图左侧为红外加热显现, 右侧为IDO超声雾化法显现）Fig.4 Comparison between infrared heating (left) and ultrasonic-atomized IDO vapor immersing (right) to develop fingerprint on different types of toilet paper (a-d. both the used toilet paper and order are same as those in Fig. 1)

2.2.5 IDO超声雾化室温和加热加湿条件下显现

将第五组实验样本均放入超声波雾化器中, 向雾化器溶液杯中加入30 mL IDO显现液, 雾化完成后一半样本放入恒温恒湿熏显柜中设定显现条件为100 ℃、60 %RH, 显现时间设为15 min; 另一半样本在30 ℃、50 %RH的室温环境下放置48 h。显现完成后将实验样本在暗室条件下置于532 nm激光下激发, 戴567 nm长通滤光眼镜, 同时在相机镜头前安装567 nm长通滤镜拍摄显现的效果。两种条件下显现的效果无明显差异（图5）。

图5

Fig.5

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	图5 IDO溶液超声雾化后室温和加热加湿条件下显现效果比较（a. 维达卷筒纸; b.怡飘竹本色纸; c.清风卷纸; d.维达面巾纸。各图左侧为室温条件显现, 右侧为加热加湿条件显现）Fig.5 Comparison between ultrasonic-atomized IDO vapor immersing added of heating plus humidifying (right) or none (keeping at room temperature) (left) to develop fingerprint on different types of toilet paper (a-d: both the used toilet paper and order are same as those in Fig. 1)

不同种类卫生纸上各方法显现效果统计见补充材料表S1, 显现效果分级参考文献^[10]。

通过比较发现, IDO对卫生纸这类客体上的汗潜手印显现灵敏度要远高于茚三酮、DMAC和红外加热荧光法, 在实际工作中IDO溶液法应是显现这类客体上汗潜手印的首选, 但是用IDO溶液浸泡法会造成显现的手印纹线扩散, 显现效果不稳定, 用超声雾化显现液的方法相对浸泡或涂抹法显现效果要更好。

从显现的效果来看, IDO在室温（30 ℃、60 %RH）条件下显现的效果和100 ℃、60 %RH的条件下显现的效果没有明显的差异, 只是显现所用的时间较长, 当然在实际操作过程中放置时间不一定必须是48 h, 可以随时掌握显现进度, 一旦达到检验鉴定条件就可以拍照固定后进行下一步的DNA检验。加热显现方法处理后的检材在检验DNA时会有一定的影响^[11], 采用上述的室温条件显现方法不但不影响手印显现的效果, 同时也减少了对后期的DNA检验的影响^[12], 因此在实际工作中如果考虑到下一步的DNA检验, 室温条件下显现是首选的显现方法。

在本次实验中发现对于黄色竹本纸显现效果不是很稳定, 同等条件下较其他种类的卫生纸显现效果略差, 具体原因尚不清楚, 还需进一步研究。本次实验研究的对象是市面上销售的常见的卫生纸, 对于更多的其他种类卫生纸效果如何有待进一步研究, 同时对于其他渗透性客体上的汗潜手印显现是否有借鉴意义也有待进一步实验, 所以在显现前最好做同材质的对照实验, 防止造成无法挽回的损失。