标准品2800 M（浓度：10 ng/μ L, promega公司）; 自制指纹样本, 7人的食指、中指、无名指分别在载玻片上各按一枚指纹, 力度适中, 按压时间5 s左右, 共21枚指纹样本。本实验室日常案件送检的接触性检材（均为棉签擦拭脱落细胞或脱落细胞粘取器粘取的脱落细胞, 如窗框拭子、作案工具拭子、嫌疑人遗留现场物品的粘取物等）, 共计870份, 检材未做区分。KingFisher磁珠提取纯化系统（低通量版及高通量版）（博坤生物公司）、ML-超微量磁珠法DNA提取试剂盒（博坤生物公司）、ProFlex™ PCR系统（Thermo公司）、3500xL基因分析仪（ABI公司）、ID Plus扩增试剂盒（ABI公司）。

1.2.1 提取

不同起始量标准DNA的回收实验。取DNA标准品2800M（10 ng/μ L）5μ L加入到495 μ L高纯水中, 稀释成0.1 ng/μ L的纯DNA标准品; 分别吸取1.0、1.5、2.0、2.5 μ L稀释后样本, 使用ML-超微量磁珠法DNA提取试剂盒对其消化, 进行0.1、0.15、0.2、0.25 ng纯DNA回收实验, 洗脱体积为30 μ L, 每个浓度平行进行10次试验。将预处理后的消化产物转移到KingFisher磁珠提取纯化系统（低通量版, 24道）进行自动化DNA提取。

单枚指纹DNA提取实验。利用擦拭1号（博坤生物公司）, 按照干湿标准两步法对载玻片上指纹样本进行擦拭后放入1.5 mL离心管中。按试剂说明书使用ML-超微量磁珠法DNA提取试剂盒对其进行消化。将消化产物转移到KingFisher磁珠提取纯化系统（低通量版）进行自动化DNA提取。

案件接触性检材检验实验。棉签擦拭物检材直接剪取棉头表层并置于离心提篮内; 脱落细胞粘取器粘取物直接取整个膜片放入1.5 mL离心管管底。除KingFisher磁珠提取纯化系统选用高通量版外, 其余同“ 单枚指纹DNA提取实验” 操作。

1.2.2 扩增及电泳分析

提取DNA的溶液采用ID Plus扩增试剂盒经ProFlex™ PCR系统, 以10 μ L体系（模板均为1μ L）扩增。扩增产物经3500xL遗传分析仪进行检测, GeneMarker软件进行STR分型（RFU> 50）。未检出或检出10个基因座以下视为非有效检出, 检出10个及以上基因座则作有效检出。

将各样本STR分型图谱与已知标准DNA分型进行比对, 结果显示所有样本均得到准确分型（表1）, 但0.1 ng标准DNA样本有一个在D7S820基因座缺失一个位点, 另一个其RFU峰值偏低, 只有51。其他0.15、0.2、0.25 ng标准DNA样本均检出完整STR分型。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 不同起始量标准DNA回收样本检测结果 Table 1 Standard DNA recoveries from different initial quantities of DNA 起始标准DNA量/ng 平行实验个数 STR分型检出完整分型个数 RFU峰值 范围 0.1 10 8 500~2000 0.15 10 10 500~3000 0.2 10 10 1000-3000 0.25 10 10 1000~3000

表1 不同起始量标准DNA回收样本检测结果 Table 1 Standard DNA recoveries from different initial quantities of DNA

将样本检出分型与被取样者的分型比对（表2）, 其中11个样本检出10个以上基因座的单一分型, 且与被取样者分型一致; 虽有1个混合分型, 但以被取样者的分型为主要峰型。非有效DNA检出率为42.8%; 有效DNA检出率为57.2%。

表 2

Table 2

表 2(Table 2)

表 2 单枚指纹样本检测结果 Table 2 Amount of exposed STR loci of the DNA extracted from single fingerprints 检材数 21 单一16 基因座 单一13~15 基因座 单一10~13 基因座 混合16 基因座 10基因座以下 未检出 8 2 1 1 6 3 38.1% 9.5% 4.8% 4.8% 28.6% 14.2% 合计 12（57.2%） 9（42.8%）

表 2 单枚指纹样本检测结果 Table 2 Amount of exposed STR loci of the DNA extracted from single fingerprints

870例实验检材检验结果见表3。

表 3

Table 3

表 3(Table 3)

表 3 870例案件送检脱落细胞类检材检测结果 Table 3 Statistics of detected STR loci of exfoliated cells from 870 contact samples collected in daily forensic casework 检材数 870 单一16 基因座 单一13~15 基因座 单一10~13 基因座 混合16基因座 10基因座以下 未检出 206 22 51 343 70 178 23.7% 2.5% 5.9% 39.4% 8.0% 20.5% 合计 622（71.5%） 248（28.5%）

表 3 870例案件送检脱落细胞类检材检测结果 Table 3 Statistics of detected STR loci of exfoliated cells from 870 contact samples collected in daily forensic casework

其中206个样本检出单一16基因座分型, 22个样本检出单一13~15基因座分型, 51个样本检出单一10~13基因座分型, 343个样本检出混合16基因座分型; 70个样本检出10基因座以下分型, 178个样本未检出分型。未检出或10基因座以下分型视为非有效DNA提取, 占比为28.5%; 故有效DNA检出率为71.5%。