外衣兜内接触性DNA的检验
夏雷, 段紫英, 陈立彰, 富渭鑫
温州市公安局刑事科学技术研究所,浙江 温州 325200

第一作者简介:夏雷(1987—),男,浙江瑞安人,硕士,法医师,研究方向为法医物证检验。E-email:xl31613179@163.com

摘要

目的 检验3起案件现场衣物3件,探讨此类生物检材的DNA检验策略。方法 使用QIAcube核酸自动化提取仪提取脱落细胞DNA,AmpFLSTR® Identifler® Plus Kit试剂盒进行STR复合扩增,以ABI3500xL基因分析仪电泳,GeneMapper® ID-X软件作基因分型。结果 检验的3件外套内兜均成功获得STR分型,相关案件得以侦破。结论 根据现场遗留衣物并结合案件情况,采取有效检验策略和手段,可明显提高相关STR分型成功率,为案件侦破提供有力的技术支撑。

关键词: 生物物证; 接触性DNA; DNA检验; 外衣
中图分类号:DF795.2 文献标志码:B 文章编号:1008-3650(2017)06-0515-02
STR Test of Touch DNA Extracted from Coat Pockets
XIA Lei, DUAN Ziying, CHEN Lizhang, FU Weixin
Institute of Forensic Science, Wenzhou Public Security Bureau, Wenzhou 325000, Zhejiang, China
Abstract

Objective To explore the strategy about STR test for the DNA evidential materials of exfoliated cells collected from coat pocket that was involved with the crime.Methods DNA,extracted from the exfoliated cells with QIAcube Forensic Casework DNA extraction system, was taken as the template to undergo the PCR amplification and capillary electrophoresis for STR genotyping analysis.Results STR genotyping profiles were successfully acquired from each of the seized coat pockets, making the relevant 3 cases uncovered promptly.Conclusions Biologically evidential materials, such as exfoliated cells from coat or other clothes left at the crime scene, can significantly reveal their STR profiling and powerfully provide technical supports for the involved case to be solved when the efficient DNA test strategy was adopted based on the case situation.

Key words: biological evidence; touch DNA; DNA examination; coat

近年来, 随着微量DNA检验技术的广泛应用, 接触类检材在各类生物检材中的占比越来越高, 发挥作用也越来越显著。但环境、载体、接触方式、个体差异等因素对接触类检材DNA的检验存在不同程度的影响, 需要采取针对性的处理、提取与检验策略[1, 2]。在实际检验中, 现场物证的准确提取、分类和检验对加快案件的侦破起着举足轻重的作用, 例如衣物作为遗留在犯罪现场的重要物证, 对其归属作认定, 就有助于锁定或排除嫌疑人, 为案件提供关键性线索。通常, 衣物上的DNA检验成功率高, 能给案件侦查带来方便, 但接触衣物的人员繁杂, 会给DNA检验的STR结果分析带来困难。对衣物检验的成功案例已有报道[3, 4, 5]。本文通过3个案例, 讨论日常案件中外衣检验鉴定的要点, 探索相类似生物检材处理的经验和检验策略。

1 材料与方法
1.1 检材来源

案例1:2015年某日, 我市某区连续发生数起入室盗窃案, 现场未提取到有价值的检材。后抓获一名嫌疑人, 但其拒不交待, 使案件陷入僵局; 后于该嫌疑人家中搜取到可疑外衣一件, 而此外衣也同时被一受害人称为自己所有。办案人员将此外衣送检, 要求进行DNA检验, 以确认其归属。案例2:2016年某日, 我市某村一路段发生一起伤害致死案件, 现场发现两名受害人, 一死一伤, 伤者送医抢救, 但于次日死亡。技术人员提取到现场树枝上的绿色外衣一件。案例3:2016年某日, 我市某十字路口发生一起抢劫案。受害人称被一男子抢走一手提包, 侦查人员根据视频侦查, 发现嫌疑人将一件外衣及受害人手提包藏匿于某公园内一树下, 遂提取该外衣并送DNA检验。

1.2 试剂、仪器

ZB800-1真空吸尘器(海尔, 中国)、9700PCR扩增仪与ABI3500xL型基因分析仪及GeneMapper® ID-X分析软件和AmpFLSTR® Identifler® Plus Kit试剂盒(AB, 美国)、QIAcube核酸自动提取工作站与QIAamp® DNA Investigator Kit试剂盒(QIAGEN公司, 德国)。

1.3 方法

1)DNA提取:在真空吸尘器进风口处放置3层滤膜, 贴放于内径约2 cm的吸筒处并压紧。开启吸尘器分别对上述案件外衣领口、袖口、衣兜处吸扫1 min, 使脱落细胞转移至3层滤膜上; 剪取第2层滤膜中间部位约2 cm× 2 cm大小, 置于1.5 mL离心管内[3, 6]。利用棉签擦拭法提取拉链部位脱落细胞, 剪取部分棉签也置于1.5 mL离心管内。利用QIAcube纯化法[7]提取所富集脱落细胞的DNA:加入300 μ L ATL, 于56 ℃、800 r/min振荡孵育1 h; 13 000 r/min离心5 min, 将上清转移至另一1.5 mL离心管中, 在QIAcube核酸自动化提取仪上进行提取纯化, 获得20μ L模板DNA。2)PCR及电泳分析:取上述各检材DNA模板适量, 使用AmpFLSTR® Identifler® Plus Kit试剂盒和9700 PCR扩增仪进行复合扩增, 扩增体系为10 μ L, 其中反应液4 μ L, 引物2 μ L, 模板量4 μ L, 参照试剂盒说明设置循环参数。取1 μ L 扩增产物、0.5 μ L内标LIZ500和9.5 μ L去离子甲酰胺混合, 用ABI3500 xL型基因分析仪电泳检测、GeneMapper ID-X分析STR分型。

2 结果与讨论

案例1中外衣领口、袖口均检出两个个体混合STR分型; 但衣兜检出的STR分型呈现为与受害人STR分型一致, 故最终确认该外衣为受害人所有, 嫌疑人认罪。案例2中外衣的领口、袖口均检出混合STR分型, 但无法分析; 而衣兜检出较完整的STR分型, 经DNA数据库快速比对, 成功锁定嫌疑人并将其抓获。案例3中外衣的领口、袖口均检出混合STR分型; 衣兜检出了完好的STR分型并与嫌疑人STR分型一致。三个案例中拉链部位均未检见STR分型。本文案例, 由于其余生物检材未获取或虽得到但显现的STR分型不能提供有用信息, 使案件侦破受阻。此时, 外衣成为了重要突破口, 采用合适的实验方法进行提取检验就成为案件侦破的关键。

衣物是案件中较常见的检材, 一般认为衣物上留有较多的脱落细胞。衣物领口、袖口、腋下、拉链等部位是人穿着时最频繁接触的部位, 因此常成为DNA检验的选取部位。考虑到衣物种类的多样性, 比如背心、T恤衫、马夹、外套等, 与身体接触部位不一致, 就会直接导致对不同衣物检验及实验策略的差异性。日常生活中, 不同人员穿着同一件衣物的情况时有发生, 因此, 衣物领口、袖口、拉链等较暴露的部位常附有多人的接触性DNA。先前报道采用负压吸附采集法均成功获得了STR分型, 虽然有的检出的是两个体的混合STR分型; 此外传统剪取法有时可获得部分完好STR分型[3, 4, 5, 6]。本文3个案例, 由于充分考虑了衣着习惯(双手插兜、物品存放等)、季节(寒冷天气衣物领口、袖口会被厚实衣服遮挡)、外套内兜密封性(微量DNA能得到较好保存)等综合因素, 尽量多转移检材中的脱落细胞, 同时避免无效样本混入, 采用高效的检验方法, 更好地发掘微量物证检材的证据价值, 从而成功提取出外套内兜附着的脱落细胞及其DNA。类似检材的检验可由此得到启发和参考。

The authors have declared that no competing interests exist.

作者已声明无竞争性利益关系。

参考文献
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