本实验旨在研究Kingfisher FLEX工作站提取脱落细胞检材的效果如何, 所以在判定检材检验结果时, PowerPlex^® 18D试剂盒17个STR基因座中有任意12个STR基因座的峰高大于200（包括检出单一来源STR基因分型及混合STR基因分型）, 即认为该检材成功检出STR基因分型。应用Kingfisher FLEX工作站批量提取脱落细胞检材DNA, 总计920 份现场脱落细胞检材中, 549份检材检出12个以上STR基因座分型, 成功率达到59.7 %。

脱落细胞检材能否检验成功受诸多因素的影响, 个体差异、载体属性、接触时间、遗留时间、检验时能否突出重点部位、检验策略的选取和结果分析等是影响接触DNA检验成功率的主要因素^[5]。脱落细胞检材DNA检验已经发展为常规检验项目, 本实验室每周受理各类脱落细胞检材约100 份, 占受理检材总数的30 %左右。应用Kingfisher FLEX自动化工作站对脱落细胞检材批量进行DNA提取, 从裂解到获得DNA样品, 整个提取过程大约2 h, 一次可同时进行 96个样品的提取, 操作简单快捷, 适应快速提取纯化, 大大提高了检验效率。磁珠法提取的DNA纯度高可以不需要离心, 适合于自动化提取及微量、污染检材的DNA提取^[6]。杨电^[7]等研究显示脱落细胞检材的前处理方式对磁珠法提取DNA效果有明显的影响, 用预消化法获得的DNA量高于裂解法。LC-超微磁珠DNA提取试剂盒的检材消化温度是56 ℃, 样本在温度较低的状态下长时间（60~180 min）消化后, DNA产量较高。本实验所有脱落细胞检材在1.2 mL试管中使用400 μ L消化液进行大体积消化, 检材均可以完全浸没在消化液中, 可以满足脱落细胞检材体积较大的要求。脱落细胞检材DNA普遍量微, 如何防止污染是DNA提取过程中面临的一大难题, 采用Kingfisher FLEX自动化工作站, 整个提取过程由机器自动完成, 没有人为干扰, 可有效地避免污染。最终洗脱时的高纯水量可以低至30 μ L, 获得的DNA溶液纯度高、浓度大, STR检验成功率高。而且磁珠还有半定量作用, 15 μ L磁珠约吸附 200 ng的DNA, 因此磁珠法提取可减少样品DNA含量之间的过大差别, 特别适合脱落细胞检材DNA的提取。

本研究表明, Kingfisher FLEX自动工作站性能稳定, 与LC-超微磁珠DNA提取试剂盒配合使用, 具有通量大、实验标准统一、操作稳定可靠、重复性良好、检出率高、提取耗时短、可以减轻检验人员的工作强度等优点, 适用于脱落细胞检材DNA的批量提取。