引用本文
乔杰, 丁肇炜, 陈欢, 赵鹏程. 高效液相色谱-蒸发光散射法分析植物油物证种属特征[J].刑事技术, 2017,42(1):40-43
QIAO Jie, DING Zhaowei, CHEN Huan, ZHAO Pengcheng. Analyzing Species Characteristics of Vegetable Oil by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) - Evaporative Light-Scattering[J].
Forensic Science and Technology ,2017,42(1): 40-43
Permissions
Copyright©2017, 《刑事技术》编辑部
《刑事技术》编辑部
高效液相色谱-蒸发光散射法分析植物油物证种属特征
乔杰
1 , 丁肇炜
2 , 陈欢
3 , 赵鹏程
4
2.铁道警察学院,郑州450053,3.浙江汉博司法鉴定中心,杭州310012
第一作者简介:乔 杰(1991—),女,河南周口人,硕士研究生,研究方向为微量物证分析。Email: JOYCCPC@163.com
基金资助 : 公安部应用创新计划项目(No: 2012YYCXXJXY128)
摘要
目的 本文采用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD),利用甘油三酯的组分鉴别11种植物油(大豆油、菜籽油、玉米油、花生油、芥花籽油、葵花籽油、橄榄油、芝麻油、胡麻油、油茶籽油、亚麻籽油)种属。方法 采集11种植物油,采用丙酮提取后直接进样分析,色谱柱条件为C18反相柱,流动相为二氯甲烷-乙腈-冰乙酸( 30:70:0.2, V/V/V) ,流速1. 0 mL/min,采用蒸发光散射检测器检测,保持柱温35 ℃,使各种甘油三酯分离开来,对比处理各种谱图数据。结果 11种植物油的谱图数据特征性强,能够使其相互区分开来。结论 甘油三酯可以作为鉴定这11种植物油种属的依据。
关键词 :
甘油三酯 ; 植物油 ; 高效液相-蒸发光散射法
中图分类号:DF794.3
文献标志码:A
文章编号:1008-3650(2017)01-0040-004
doi : 10.16467/j.1008-3650.2017.01.009
Analyzing Species Characteristics of Vegetable Oil by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) - Evaporative Light-Scattering
QIAO Jie
1 , DING Zhaowei
2 , CHEN Huan
3 , ZHAO Pengcheng
4
1. Henan Police College, Zhengzhou 450046
2. Railway Police College, Zhongzhou 450053
3. Zhejiang Hanbo Judicial Authentication Center, Hangzhou 310012, China
4. National Police University of China, Shenyang 110035, China
Abstract
Objective To identify the species of 11-kind vegetable oils (ones of soybean, rapeseed, corn, peanut, canola, sunflower, olive, sesame, benne, tea-seed and linseed) with their components of triglyceride by high performance liquid chromatography - evaporative light-scattering detection (HPLC - ELSD).Methods The 11-kind vegetable oils were collected for the experiment. The samples were analyzed after acetone extraction, with a C18 reverse phase column as the chromatographic operation. The mobile phase is a mixture of methylene chloride/acetonitrile/glacial acetic acid (30:70:0.2, V/V/V), running at 1.0 ml/min. With an evaporative light-scattering detector, every kind of triglyceride from each oil was tested to separate by the chromatographic column at the temperature 35 ℃. All of the spectral data were gathered and compared.Results The 11-kind vegetable oils are specific of one another from their individual characteristic spectrums, making them distinguished one from the others.Conclusion Triglyceride can be used as the substance for species identification of the 11-kind vegetable oils.
Key words :
triglyceride ; vegetable oil ; high performance liquid - evaporative light-scattering detection (HPLC - ELSD)
食用植物油是民众日常生活中的必需品, 在市场中具有很高需求量。然而一些不法商贩为追逐更高的经济利益, 用掺假植物油以次充好进行销售, 这些不法行为严重影响了消费者的合法权益和身体健康, 破坏了市场秩序。在打击这些违法行为的过程中, 涉假油脂物证的检验结果是重要的证据。本文在对植物油脂种属特征的研究基础上[1 , 2 , 3 ] , 采用高效液相色谱-蒸发光散射法对甘油三酯标准品和常见食用植物油的特征谱图进行了系统分析, 通过比较不同植物油的特征性甘油三酯谱图对其加以区分, 为揭露、打击植物油脂造假违法行为提供依据。
1 材料和方法 1.1 食用油样品 市售食用植物油样品11份(见表1 )。
表1
Table 1
表1(Table 1)
表1 食用植物油样品一览表 Table 1 Vegetable oils to test 种类 品牌 规格 产地 精炼一级大豆油 金龙鱼 1.8L 秦皇岛 玉米油(玉米胚芽) 金龙鱼 900mL 北京 花生油 刀唛 900mL 深圳 芥花籽油 刀唛 900mL 深圳 特香纯黄菜籽油(非转) 仙餐牌 900mL 成都 葵花籽油 刀唛 900mL 深圳 特级初榨橄榄油 圣玛仕格 250mL 突尼斯 芝麻油 太太乐 230mL 上海 胡麻油 星海湖 250mL 宁夏 油茶籽油 得尔乐 325mL 江西玉山 亚麻籽油 蒙草堂 250mL 内蒙古
表1 食用植物油样品一览表 Table 1 Vegetable oils to test
1.2 样品溶液及甘油三酯标准品溶液的配制 标准甘油三酯:月桂酸甘油酯(LaLaLa)、1, 2-亚油酸-3-棕榈酸甘油酯(LLP)、1, 2亚油酸-3-油酸甘油酯(LLO)、1, 2-豆蔻酸-3-棕榈酸甘油酯(MMP)、油酸甘油三酯(OOO)、1, 2-油酸-3-棕榈酸甘油酯(OOP)、1, 3-油酸-2-棕榈酸甘油酯(OPO)、1, 2-油酸-3-硬脂酸甘油酯(OOSt)、1, 3-油酸-2-硬脂酸甘油酯(OStO)、1-棕榈酸-2油酸-3-亚油酸甘油酯(POL)、1, 2-棕榈酸-3-油酸甘油酯(PPO)、1, 3-棕榈酸-2-油酸甘油酯(POP)、1-棕榈酸-2-亚油酸-3-硬脂酸甘油酯(PLSt)、1-硬脂酸-2-油酸-3-硬脂酸甘油酯(POSt)、1, 2-棕榈酸-3-硬脂酸甘油酯(PPSt)、1-硬脂酸-2-棕榈酸-3-油酸甘油酯(StPO)、1, 2-硬脂酸-3-油酸甘油酯(StStO)、1, 3-硬脂酸-2-棕榈酸甘油酯(StPSt)。分别称取18种标准品各2.0 mg置于10.0 mL容量瓶中, 用丙酮溶解、定容, 配制成甘油三酯标准溶液, 检测时分别取等量混合制成混合标准样品溶液, 待测。分别取11种食用油样品1微升溶解于1mL丙酮中, 配成样品溶液, 待测。
1.3 仪器及条件 美国Agilent 1100series高效液相色谱仪; Waters C18色谱柱(150 mm× 3.9 mm, 4 μ m); 柱温:35 ℃; 流动相:二氯甲烷-乙腈-冰乙酸(体积比30꞉70꞉0.2); 流速:1.0mL/min; 蒸发光散射检测器(Model 1400ELSD); 漂移管温度:70 ℃; 雾化管温度:30 ℃; 光学池温度:80 ℃; 排气管温度:60 ℃; GAS:45~55 P; 柱温箱温度:35 ℃[4 , 5 , 6 , 7 ] 。
2 结果与讨论 2.1 甘油三酯混合标准溶液的分析 采用乔杰[8]的方法分析标准品, 结果如图1。
2.2 各种植物油样品的HPLC - ELSD特征谱图分析 本文实验中选取了11种市售植物油, 经实验验证不同种属的植物油甘油三酯的特征色谱峰有较大差异。在大豆油中, LLO、LLP、MMP、POL以及两种未知的甘油三酯的色谱特征比较明显, 而OPO/OOP、PLSt、PPO/POP的色谱峰响应值均较低(见图2)。
两种菜籽油的色谱特征基本一致, 均含有LLO、LLP、MMP、POL、OOO、OPO/OOP以及两种未知的甘油三酯; 从甘油三酯的相对含量看, 两种菜籽油中的MMP和OOO的相对含量均较高。但二者的特征谱图仍存在细微的差异, 芥花籽油中除了两者均含有的LLO、LLP两色谱峰外还含有与二者紧邻的一未知色谱峰(见图3、图4)。
玉米油中甘油三酯相对含量由大到小的顺序依次为:LLO、未知甘三酯峰、LLP、MMP、POL、OOO、OPO/OOP(见图5)。
在花生油中, LLO、MMP、OOO、POL的相对含量较高。另外, LLP和OPO/OOP的响应值也较高, 其它甘油三酯的色谱峰响应值较低, 色谱峰不明显(见图6)。
在葵花籽油中, LLO、LLP、MMP、POL、OPO/OOP的色谱峰响应值较高(见图7)。
橄榄油中OOO相对含量最高, 其次是OPO/OOP, 然后是MMP、POL。另外, LLO、LLP、OOSt/OStO、PPO/POP的色谱响应值也比较明显(见图8)。
芝麻油中有一未知甘三酯、LLO、LLP、MMP、POL、OOO、OPO/OOP、PLSt、OOSt/OStO等甘油三酯的色谱峰(见图9)。
油茶籽油中甘三酯种类较少, 且只有OOO色谱特征比较明显(见图10)。
胡麻油和亚麻籽油的特征谱图非常相像, 按照出峰时间先后都含有:一个含量最高的未知峰, LaLaLa, 紧接着是四个未知峰, 然后是LLO、LLP、MMP、POL(见图11、图12)。
3 结 论 从这些植物油纯品谱图来看, 实验所用的11种植物油在相同实验条件下, 因人为提炼的原因, 所含杂峰也较少, 均含有LLO、LLP、MMP、POL这4种甘油三酯。但不同样品还具有其特征甘油三酯组分, 通过分析这11种植物油的甘油三酯特征谱图, 按照所含的甘油三酯种类以及其特征峰的面积相对含量能够很清晰的区分出来这11种植物油, 为分析掺假植物油的检验提供实验基础(见表2 )。
表2
Table 2
表2(Table 2)
表2 11种植物油甘油三酯特征峰峰面积的相对含量 Table 2 Relative values of the characteristic peak areas from 11-kind vegetable oils’ triglycerides 植物油种类 各种甘油三酯峰面积的相对含量(%) LaLaLa LLO LLP MMP POL OOO OPO/OOP PLSt PPO/POP StPO/POSt OOS/ OStO 大豆油 0.959 18.081 15.729 8.254 12.195 2.216 2.754 1.622 1.193 0 0 菜籽油 0 8.318 12.167 24.848 4.375 30.73 4.338 1.726 4.654 0 0 芥花籽油 0 13.313 9.201 21.731 7.998 24.918 5.601 0 0 0 0 玉米油 0 24.977 16.086 13.007 13.369 4.4 3.903 0 0 0 0 花生油 0 15.887 6.841 19.101 13.43 26.581 11.13 0 0 0 0 葵花籽油 0 33.054 10.176 7.53 8.961 6.74 0 0 0 0 0 橄榄油 0 4.558 2.049 19.822 13.799 29.392 24.861 0 3.078 1.341 0 芝麻油 0 23.362 7.257 19.701 13.684 11.251 4.685 4.12 0 0 2.227 油茶籽油 0 7.785 2.556 0 0 70.529 16.714 0 0 0 0 胡麻油 12.919 4.854 9.287 5.726 3.811 0 5.528 0 0 0 0 亚麻籽油 17.043 5.989 3.121 0.887 1.678 0 0 0 0 0 0
表2 11种植物油甘油三酯特征峰峰面积的相对含量 Table 2 Relative values of the characteristic peak areas from 11-kind vegetable oils’ triglycerides
The authors have declared that no competing interests exist.
参考文献
[1]
丁军凯 , 范垂昌 . 瞬时裂解甲基化技术——一种快速鉴别人体脂肪及动植物油脂的色谱分析方法 [J]. 刑事技术 , 1996 (3 ): 5 -9 .
[本文引用:1]
[2]
丁军凯 , 闫福宁 , 喻晓光 等 . 同时裂解甲基化气相色谱法快速鉴别人体脂肪及动植物油脂 [J]. 中国法医学杂志 , 1998 (4 ): 227 -230 .
[本文引用:1]
[3]
张炳谦 , 王季中 , 孙桂进 . 人体脂肪及动植物油脂的GC-MS/MS法分析 [J]. 中国人民公安大学学报(自然科学版) , 2004 (4 ): 10 -12 .
[本文引用:1]
[4]
王继芬 , 姚琳桃 , 张桂霞 . 痕量动物油和植物油的区分检验研究 [J]. 化学研究与应用 , 2008 (11 ): 1514 -1519 .
[本文引用:1]
[5]
刘涛 , 尹春华 , 谭天伟 . 高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定脂肪酸和甘油酯的含量 [J]. 中国油脂 , 2005 , (9 ): 50 -53 .
[本文引用:1]
[6]
王磊 , 史晓凡 , 许英健 , 等 . 人体脂肪的高效液相色谱-蒸发光散射分析 [J]. 中国司法鉴定 , 2013 (3 ): 29 -32 .
[本文引用:1]
[7]
史晓凡 , 周欣欣 , 王磊 等 . 高效液相色谱-蒸发光散射法分析人和动物油脂种属 [J]. 中国法医学杂志 , 2013 (2 ): 116 -118 .
[本文引用:1]
[8]
乔杰 , 赵鹏程 , 许英健 , 等 . 高效液相色谱-蒸发光散射法分析油脂物证种属特征 [J]. 刑事技术 , 2015 (5 ): 400 -403 .
[本文引用:1]
1
0.0
0.0
... 本文在对植物油脂种属特征的研究基础上[1 ,2 ,3 ] ,采用高效液相色谱-蒸发光散射法对甘油三酯标准品和常见食用植物油的特征谱图进行了系统分析,通过比较不同植物油的特征性甘油三酯谱图对其加以区分,为揭露、打击植物油脂造假违法行为提供依据 ...
1
0.0
0.0
丁军凯 , 闫福宁 , 喻晓光 等 . 同时裂解甲基化气相色谱法快速鉴别人体脂肪及动植物油脂 [J]. 中国法医学杂志 , 1998 (4 ): 227 -230 .
采用同时裂解甲基化气相色谱法(SPM-GC),首次分析人体脂肪,并且观察人体脂肪、猪、鸡、牛、羊脂和豆油中7种脂肪酸的组份含量变化。根据7种主要脂肪酸(肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸)甲酯的百分含量可有效地进行鉴别。结果表明:通过SPM-GC法分析油脂,可将传统的油脂酯化法时间由2个多小时缩短到1分钟左右。数据C.V.%<4%,最小检测量为1.Oμg。最佳比例四甲基氢氧化按(TMAH)甲醇液(TMAH:甲醇=1:10,V/V),可消除油脂中多不饱和脂肪酸的异构化和降解。
... 本文在对植物油脂种属特征的研究基础上[1 ,2 ,3 ] ,采用高效液相色谱-蒸发光散射法对甘油三酯标准品和常见食用植物油的特征谱图进行了系统分析,通过比较不同植物油的特征性甘油三酯谱图对其加以区分,为揭露、打击植物油脂造假违法行为提供依据 ...
1
0.0
0.0
张炳谦 , 王季中 , 孙桂进 . 人体脂肪及动植物油脂的GC-MS/MS法分析 [J]. 中国人民公安大学学报(自然科学版) , 2004 (4 ): 10 -12 .
利用气相色谱-串联质谱联用法研究了人体脂肪和动植物油脂中主要脂肪酸的组成,有效地降低了杂质背景干扰,提高了检测的相对灵敏度.方法快速、高效、可靠.现场提取0.2 mg以上的油脂即可得到有效鉴别.
... 本文在对植物油脂种属特征的研究基础上[1 ,2 ,3 ] ,采用高效液相色谱-蒸发光散射法对甘油三酯标准品和常见食用植物油的特征谱图进行了系统分析,通过比较不同植物油的特征性甘油三酯谱图对其加以区分,为揭露、打击植物油脂造假违法行为提供依据 ...
1
0.0
0.0
王继芬 , 姚琳桃 , 张桂霞 . 痕量动物油和植物油的区分检验研究 [J]. 化学研究与应用 , 2008 (11 ): 1514 -1519 .
采用碱催化甲酯化的前处理方法,应用气相色谱-质谱联用技术对动物油和植物油的区分检验进行了研究.实验检出了6种主要脂肪酸:肉豆蔻酸、棕榈油酸、棕榈酸、亚油酸、油酸、硬脂酸.分析了动物油与植物油在成分及相对含量上的差异,并且找出了动物油和植物油在不饱和度上的差别.根据动物油与植物油的差异点,可以对动物油和植物油进行区分.
... 柱温箱温度:35 ℃[4 ,5 ,6 ,7 ] ...
1
2005
0.0
0.0
刘涛 , 尹春华 , 谭天伟 . 高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定脂肪酸和甘油酯的含量 [J]. 中国油脂 , 2005 , (9 ): 50 -53 .
建立了一种利用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测、通过梯度洗脱测定油脂中脂肪酸、单甘酯、二甘酯与三甘酯含量的方法,色谱柱是C18反相柱,流动相为乙腈(0.05%醋酸V/V)-二氯甲烷,流速1.0 mL/min;蒸发光散射检测器漂移管温度70℃,载气流速1.7L/min.各物质色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系,精密度RSD为0.43%~2.75%,最低检测限为0.02~0.04μg,回收率测定值为93.2%~104.5%.该方法不仅可以准确、快速地定量、定性分析各类混合脂肪酸甘油酯和游离脂肪酸,而且还可以分离具有立体异构的单甘酯和二甘酯.
... 柱温箱温度:35 ℃[4 ,5 ,6 ,7 ] ...
1
0.0
0.0
王磊 , 史晓凡 , 许英健 , 等 . 人体脂肪的高效液相色谱-蒸发光散射分析 [J]. 中国司法鉴定 , 2013 (3 ): 29 -32 .
摘 要: 目的建立凶杀案件现场遗留的微量人体脂肪残渣种属的检验鉴定方法。方法用丙酮溶解人体油脂、 动物油脂,油脂溶液进行高效液相色谱-蒸发光散射分析。结果人体脂肪的液相色谱数据特征性强,与常见动物油脂差异显著,可作为鉴定人体脂肪种属的依据。检 材不受各种环境因素的干扰,对于腐败的人体脂肪仍可得出准确鉴定结论。结论高效液相色谱-蒸发光散射方法是检验鉴定微量人体脂肪种属的一种有效手段。
... 柱温箱温度:35 ℃[4 ,5 ,6 ,7 ] ...
1
0.0
0.0
史晓凡 , 周欣欣 , 王磊 等 . 高效液相色谱-蒸发光散射法分析人和动物油脂种属 [J]. 中国法医学杂志 , 2013 (2 ): 116 -118 .
目的 采用反相高效液相色谱-蒸发光散射方法分析人和动物油脂种属.方法 采集人体和7种动物(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鱼)油脂,丙酮溶解后直接进样分析,色谱柱为C18反相柱,流动相为二氯甲烷-乙腈(30∶70 V/V),流速1.0mL/min,蒸发光散射检测器进行检测.结果 采用本文方法检测POSt、MMP、StPSt、OPO 4种甘油三酯组分分离效果良好;用于油脂分析,其主要组分高级脂肪酸三甘酯均得到了有效分离,色谱峰的保留时间和相对峰面积比的重现性好;与动物油脂比 较,人体油脂具有独特的色谱特征;动物之间色谱特征也有差异.结论 采用本文高效液相色谱-蒸发光散射法检测油脂,可根据人体油脂与动物油脂色谱特征的差异为油脂种属鉴定提供依据.
... 柱温箱温度:35 ℃[4 ,5 ,6 ,7 ] ...
1
0.0
0.0
乔杰 , 赵鹏程 , 许英健 , 等 . 高效液相色谱-蒸发光散射法分析油脂物证种属特征 [J]. 刑事技术 , 2015 (5 ): 400 -403 .
目的采用高效液相色谱-蒸发光散射法分析确定人体以及七种动物油脂的甘油三酯种属特征。方法用丙酮溶解19种甘油三酯标准品,分析这19种标准甘油三酯特征峰,色谱柱条件为C18色谱柱,流动相是二氯甲烷-乙腈-冰乙酸(30:70:0.2,V/V/V),流速1.0 m L/min,采用蒸发光散射检测器检测,以此得出特征标准峰,再对样品进行分析;采集人体、七种动物(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鱼)油脂,丙酮溶解后直接采用与标准品相同的条件进样分析,分离各种甘油三酯,对比混合标准样品特征峰处理各种谱图数据。结果人体油脂、七种动物油脂的谱图数据特征性强,能够区分人以及这七种动物。结论甘油三酯可以作为鉴定人类和这七种动物油脂种属的依据,为案件侦破指明方向。