高效液相色谱检验“神仙水”的方法研究
[张春水
, 翟晚枫* ]
, 翟晚枫]
引用本文
张春水, 翟晚枫. 高效液相色谱检验“神仙水”的方法研究[J].刑事技术, 2017,42(1):32-34
ZHANG Chunshui, ZHAI Wanfeng. Determination of the Magic Water by High Performance Liquid Chromatography[J]. Forensic Science and Technology,2017,42(1): 32-34
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ZHANG Chunshui, ZHAI Wanfeng. Determination of the Magic Water by High Performance Liquid Chromatography[J]. Forensic Science and Technology,2017,42(1): 32-34
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高效液相色谱检验“神仙水”的方法研究
第一作者简介：张春水（1974—）,男,辽宁抚顺人,学士,副研究员。研究方向为毒物毒品检验。E-mail:10039718@qq.com
摘要
目的 建立对新型毒品“神仙水”进行定性定量分析的高效液相色谱方法。方法 “神仙水”样品以甲醇稀释,振荡并通过滤膜过滤。采用岛津Inertsil ODS-SP色谱柱 (150 mm×4.6 mm, 5 μm)进行分离,流动相为磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液A（36 mmol/L,0.25 %三乙胺 V/ V）-乙腈B,梯度洗脱程序为5 %B(0.01 min)-15 %B(16 min)-75 %B(18 min)-75 %B(20 min),检测波长205 nm。结果 采用优化后的方法条件,“神仙水”样品中的三种主要有效成分甲基苯丙胺、MDMA和氯胺酮在1~100 μg/mL浓度范围内均呈良好线性,检出限LOD（S/N>3）分别为0.2、0.1、0.2 μg/mL。日内精密度均小于1.58 %,日间精密度均小于3.21 %,方法不存在系统性偏差,样品保存方法稳定性良好。结论 采用该方法检测新型毒品“神仙水”实际样本,快速、简便、准确、可靠,能够满足公安办案中对于“神仙水”毒品的检验要求。
关键词:
高效液相色谱; 新型毒品; 神仙水
中图分类号:DF795.1
文献标志码:A
文章编号:1008-3650(2017)01-0032-03
doi: 10.16467/j.1008-3650.2017.01.007
Determination of the Magic Water by High Performance Liquid Chromatography
Abstract
ObjectiveTo establish a qualitative-and-quantitative method for determination of a type-new drug, the magic water, by high performance liquid chromatography (HPLC).Method The samples of magic water were diluted with methanol, oscillated and filtered through 0.22 µm membrane. The separation was performed on a Shimadzu ODS-SP column (150 mm×4.6 mm, 5 µm). The mobile phase was the buffers of phosphate - sodium dihydrogen phosphate (A) and the acetonitrile (B) in a gradient elution, with its initial condition of 5% B followed from 5 % B (0.01 min) through 15% B (16 min) to 75% B (18-20min). The detection wavelength was set at 205 nm.Results With the optimization, the main three effective constituents, methamphetamine, MDMA and ketamine, showed a good linearity of 1~100 μg/mL, with the correlation coefficient > 0.9999. The limits of detection (LOD, under the condition of S/N>3) were respective of 0.2, 0.1 and 0.2 μg/mL. The intra- and inter-day relative standard deviations (RSDs) were less than 1.58 % and 3.21 %. The accuracy was good and the stability of sample preservation was also satisfied.Conclusion This method is rapid, simple and effective, suitable for determination of methamphetamine, MDMA and ketamine in the magic water.
Key words:
high performance liquid chromatography; new-type drugs; the magic water
“ 神仙水” 是一种日渐流行的新型毒品, 常为黄色、橙色、棕色液体。外包装多为与口服液外观相似的小瓶, 配以“ 雪山飞狐” 、“ 兰博基尼” 等新颖有趣的品名和炫目的色彩。“ 神仙水” 的成分非常复杂, 含有甲基苯丙胺、氯胺酮和MDMA等一种或多种国家管制的一类精神药品, 并且常常含有尼美西泮、可待因、愈创木酚甘油醚、美沙芬、咖啡因等多种其它成分, 摄入后有明显的欣快感。由于这种液体毒品外观明显区别于人们熟知的海洛因、冰毒等传统毒品, 犯罪分子常常故意隐瞒其“ 毒品” 本质, 谎称其能解酒提神, 或加入饮料中诱骗他人服用, 它的危害性也没有受到充分重视, 一些食用者即使对其真实成分略知一二, 仍然抱着侥幸心理认为不会上瘾, 这种液体毒品因而快速流行开来。
目前, 检测“ 神仙水” 的仪器分析方法主要是气相色谱法（GC）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）[1, 2, 3]。虽然气相色谱技术应用较为普遍, 但由于检材是水相液体, 不能直接进行气相色谱分析, 需要经过萃取等方法对样品进行前处理, 程序繁琐且定量准确度受到影响, 而液相色谱法能够直接分析水相, 简便快捷, 含量分析准确性高, 更适合“ 神仙水” 毒品的定量测定。本文开发了同时检测“ 神仙水” 中3种主要成分甲基苯丙胺、氯胺酮和MDMA的高效液相色谱定量分析方法, 以期为相关案件的检验鉴定提供参考。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
岛津Prominenece UFLC超快速液相色谱仪, 包括LC-20AD XR型泵、SPD-20A 型紫外检测器和SPD-M20A型二极管阵列检测器。甲醇（优级纯, 购自国药集团化学试剂有限公司）, 乙腈（色谱纯, 购自美国Fisher Scientific公司）。
甲基苯丙胺、氯胺酮、MDMA标准品（1.0 mg/mL, 公安部物证鉴定中心提供）; “ 神仙水” 样品（案件中收缴）。
1.2 色谱条件
岛津Inertsil ODS-SP色谱柱 (150 mm× 4.6 mm, 5 μ m), 流动相为磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液A（36 mmol/L, 0.25%三乙胺V/V）-乙腈B, 梯度洗脱程序中有机相初始浓度5%, 梯度程序为5%B(0.01 min)-15%B(16 min)-75%B(18min)-75%B(20min), 柱温35 ℃, 柱流量1.4 mL/min, 检测波长205 nm。
1.3 样品前处理方法
取适量“ 神仙水” 样本, 以适量甲醇稀释, 1 500 r/min振荡5 min, 以0.22 μ m滤膜过滤后取1.5 mL装瓶供仪器分析。
2 结果与讨论
2.1 样品前处理
由于“ 神仙水” 为水相检材, 液相色谱可以直接分析, 只需适量稀释即可。因此, 前处理过程比较简单, 我们选择常用的甲醇作为稀释溶剂, 根据经验, 目标成分的含量多在0.005 %~5 %之间, 因此, 可以移取100 μ L样本, 定容至10 mL容量瓶中, 震荡摇匀、经滤膜过滤后即可进行检测。如果样品浓度超过标准曲线端点, 再视情况调整取样量。
2.2 波长的选择
为实现对不同波长下色谱响应的考察, 采用二极管阵列检测器（DAD）对甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮混合标准溶液进行分析, 三种目标物的光谱图如图1a、1b、1c所示。可见, 在195~210 nm波长范围内目标物有较强吸收。但考虑到检测波长越低对流动相本底的干扰越大, 选择205 nm作为检测波长。
 | 图1 光谱图（a.甲基苯丙胺; b.MDMA; c.氯胺酮）Fig.1 Spectrums of methamphetamine, MDMA and ketamine |
2.3 流动相的选择
甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮在高纯水-乙腈的流动相条件下色谱峰形差、柱效低、拖尾严重, 因此尝试采用缓冲液及添加改性剂以改善色谱行为。比较了采用高纯水和50 mmol/L的磷酸-磷酸二氢纳缓冲液作为水相流动相时的效果可知, 在磷酸缓冲液条件下, 甲基苯丙胺、MDMA比在高纯水条件下具有10倍以上的柱效; 氯胺酮具有5倍以上的柱效, 同时峰形大为改善。另一方面, 添加三乙胺可以有效缓解拖尾现象。但缓冲液体系对色谱柱会造成慢性损伤并增加仪器维护难度, 因而缓冲液和改性剂浓度不宜过高。综上, 将流动相确定为磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液（36 mmol/L, 添加0.25 %三乙胺）-乙腈体系。
2.4 色谱条件优化
建立了甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮的有机相初始浓度-理论塔板数模型和梯度陡度-理论塔板数模型。用单因素实验的方法, 对上述3种目标物的液相色谱参数进行优化, 结果如图2、图3所示。甲基苯丙胺和MDMA由于结构相近, 具有相似的分离机理, 同时, 氯胺酮的色谱行为也有相同的规律。随有机相初始浓度升高, 3种物质的保留时间缩短、柱效降低（色谱峰理论塔板数减小）、响应（峰高）增加; 随梯度陡度增加, 3种物质的保留时间亦缩短, 峰高亦增加, 而理论塔板数增加。为保证较高的柱效、分离度和灵敏度, 最终确定的梯度程序为5% B (0.01min) - 15% B (16 min) - 75%B (18min) - 75% B (20 min)。优化条件下的甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮混合标准品的色谱图见图4。
 | 图2 有机相初始浓度对理论塔板数的影响Fig.2 Effect of organic phase’ s initial content on the theoretical plate number |
 | 图3 梯度陡度对理论塔板数的影响Fig.3 Effect of gradient steepness on the theoretical plate number |
 | 图4 甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮标准品的高效液相色谱图Fig.4 HPLC chromatogram of the standard methamphetamine, MDMA and ketamine |
2.5 方法验证
2.5.1 线性范围和工作曲线
外标法是实际办案中常用的定量方法, 我们建立了甲基苯丙胺、MDMA和氯胺酮的外标工作曲线, 对其线性情况进行考察。结果表明, 3种目标物在1 ~100 μ g/mL浓度范围内均呈良好线性, 甲基苯丙胺MDMA、氯胺酮的外标工作曲线为Y=1281.49X-1784.50、Y=3280.13X+6721.55、Y=1442.96X+848.01, 线性相关系数均高于0.9999。以信噪比S/N> 3计算, 检测限分别为0.2、0.1、0.2μ g/mL。
2.5.2 精密度测定
制备1.0、10.0、50.0 μ g/mL各6份混合标准品溶液, 每日伴随标准曲线检测, 计算含量, 得到日内精密度（相对标准偏差, RSD）; 连续测量6 d, 计算得到日间精密度。甲基苯丙胺、MDMA和氯胺酮日内精密度均小于1.58 %, 日间精密度均小于3.21 %, 结果表明精密度良好。
2.5.3 加标回收率测定
实验中对甲基苯丙胺、MDMA和氯胺酮的加标回收率进行了考察, 以验证所建立的方法是否存在系统性偏差。选取的神仙水样品中, 甲基苯丙胺、MDMA和氯胺酮的含量分别为0.015 %、0.021 %、0.11 %, 精密称取该已知含量的样品12份, 分别加入约为已知含量的50 %、100 %的标准品各6份, 进行前处理和色谱分析, 并计算加标回收率。结果表明, 加标回收率在96.08 %~104.39 %范围内, RSD %≤ 4.37 %, 方法不存在系统性偏差。
2.5.4 稳定性实验
取2.5.3项中的样品溶液, 用甲醇稀释10倍, 取6份于室温下分别放置3、6、12、24、48、96 h, 分别进样, 甲基苯丙胺、MDMA和氯胺酮峰面积RSD≤ 2.11 %; 取3份于-20℃和室温间反复冻融3次, 3种目标物峰面积RSD≤ 1.85 %; 另取3份于-20℃冰箱中分别放置2、5、10 d, 3种目标物峰面积RSD≤ 3.37 %。结果表明, 神仙水样品在室温放置96 h、-20 ℃放置10 d以及在室温和-20 ℃反复冻融3次的条件下均可保持稳定。
2.6 案例应用
2015年, 在某案件中缴获10瓶疑似“ 神仙水” 毒品, 为黄色液体检材。经定性分析, 确认各样品中均含有甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮毒品成分。将10瓶液体混合、振荡后, 平行取两份各200 μ L的样品, 加入甲醇稀释, 定容于10 mL容量瓶中, 用如前所述的样品前处理方法和色谱条件进行分析, 所得高效液相色谱图如图5所示。甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮样品保留时间分别为9.445、11.485、15.769 min, 与标准品色谱峰保留时间相差不超过1 %。经计算, 甲基苯丙胺、MDMA、氯胺酮毒品含量分别为0.037 %、0.39 %、0.28 %。结果表明, 采用本文建立的方法, “ 神仙水” 中3种主要目标成分色谱行为良好, 前处理及分析过程快捷、高效、准确、可靠, 适用于公安办案中神仙水样品的定量分析。
 | 图5 某神仙水检材样本的高效液相色谱图Fig.5 HPLC chromatogram from a kind of magic water sample |
The authors have declared that no competing interests exist.
作者已声明无竞争性利益关系。
参考文献
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