1025例涉案手机和电脑接头类检材的DNA检验分析
董迎春1, 李诗柳2, 言梦非1, 刘宗伟1, 朱怡3
苏州市公安局,江苏 苏州 215500
2.成都武侯区检察院,成都 610041
3.苏州大学,江苏 苏州 215000

作者简介: 董迎春(1982—)男,主检法医师,硕士,研究方向为法医遗传学. E-mail: 22298013@qq.com

摘要

本文采用改良硅珠法,对自2012年以来实验室受理的1025例涉案手机,电脑接头类检材(手机充电器接头156例,电脑网线水晶接头416例,电脑电源线接头155例,电脑显示器数据线接头22例,鼠标,键盘等USB接口类检材276例)进行分析,以检出性别及13个以上STR基因座同时图谱峰值≥200 RFU的检材计算,1025例检材检出率为87.0%,其中手机充电器接头检出率为93.6%,电脑网线水晶接头检出率为84.4%,电脑电源线接头检出率为82.0%,电脑显示器数据线接头检出率为95.5%,键盘等USB接口类检材检出率为89.5%.本研究证实,该改良硅珠法便捷,省时高效,检验效果理想,适用于法医微量物证DNA检验.

关键词: 法医物证学; 接触DNA; 改良硅珠法; 电器接头
中图分类号:DF795.2 文献标志码:中图分类号:DF795.2 文献标识号:B 文章编号:1008-3650(2015)04-0332-02 文章编号:1008-3650(2015)04-0332-02 doi: 10.16467/j.1008-3650.2015.04.019
DNA Analysis of 1025 Touch Samples from Various Appliance Connectors
DONG Yingchun1, LI Shiliu2, YAN Mengfei1, LIU Zongwei1, ZHU Yi3
1. Suzhou Public Security Bureau, Jiangsu Suzhou 215000, China
2. People’s Procuratorate of Wuhou District,Chengdu 610041, China
3. Soochow University, Jiangsu Suzhou 215000, China
Abstract

Touch DNA is now often encountered in forensic investigation. Its successful acquisition is often crucial for solving the relevant cases. In this paper, 1025 pieces of touch DNA samples tested in our laboratory since 2012 are reviewed with the purpose to find some regularity. These samples were collected from various electric connectors consisting of mobile phones’ (156 pieces), net cables’ (416 pieces), power cables’ (155 pieces), displays’ (22 pieces), and USBs’ (276 pieces). The DNA was extracted with modified method of silica, amplified with AmpFLSTR® Identifiler® Plus PCR Kit, electrophoresed with ABI3500XL. Data were analyzed with GeneMapper ID-X. The results showed that the detection rate was 93.6% for mobile phones’ connectors, 84.4% for net cables’, 82.0% for power cables’, 95.5% for displays’, and 89.5% for USBs’, with a total detection rate of 87.0% for all the 1,025 pieces of touch DNA samples. The method applied here is suitable to tackle the samples of touch DNA.

Keyword: forensic biological evidence; touch DNA; modified silicon-based method; appliance connector

近年来, 盗窃手机, 电脑等财物案件频发, 现场生物物证多为接头类等微量物证, DNA检验难度大.本实验室通过改进硅珠法, 提升了接触性检材的检出率, 笔者回顾性分析了2012年以来运用本法处理的接头类检材的检验情况并讨论.

1 材料和方法
1.1 材 料

2012年以来实验室受理的涉案手机充电器接头156例, 电脑网线水晶接头416例, 电脑电源线接头155例, 电脑显示器数据线接头22例, USB接口类(鼠标, 键盘, 音响, USB数据线, 移动硬盘, 无线网卡等)检材276例.共计1025例.

1.2 方 法

DNA提取:采用D -盾超敏DNA提取试剂盒(惠文生物技术有限公司, 上海).① 运用干湿法提取检材后, 将棉签擦拭子放入离心套管中, 加入180 μ L裂解液, 99℃ 裂解5 min; ② 8000 r/min离心2 min, 弃套管; 加入吸附液1 000 μ L, 硅珠16 μ L, 涡旋后静置15 min; ③ 8 000 r/min离心1 min, 弃上清; 加入800 μ L漂洗液, 充分混匀后8 000 r/min离心1 min, 弃上清; ④ 置于56℃ 金属浴上烘干沉淀物; 后加入20 μ L洗脱液, 充分混匀后置于56℃ 金属浴上洗脱15 min; ⑤ 16 000 r/min离心2 min, 取上清液进行PCR.

PCR反应及电泳分析:取上述各检材DNA模板适量, 使用AmpFLSTR® Identifiler® Plus PCR Kit(AB公司, 美国)试剂盒和GeneAmp PCR System 9700进行PCR复合扩增STR基因座(扩增反应体系为20 μ L, 内含mix 8 μ L, prime set 4 μ L, DNA 8 μ L), 扩增产物应用ABI3500XL型荧光分析仪电泳检测和GeneMapper ID-X分析.

2 结果和讨论

本文对包含性别及13个以上STR基因座同时图谱峰值在200RFU及以上的结果视为检验成功, 1025例实验检材检验结果统计见表1.表中结果显示, 手机充电器接头检出率为93.6%; 电脑网线水晶接头检出率为84.4%; 电脑电源线接头检出率为82.0%; 电脑显示器数据线接头检出率为95.5%; 电脑USB接口类检材(鼠标, 键盘, 音响, USB数据线, 移动硬盘, 无线网卡)检出率为89.5%; 本文涉及的检材累计检出率为87.0%.

触摸检材(touch DNA)作为低拷贝(low copy number, LCN )DNA的一种, 是近年来法医DNA检验的热点和难点之一.但触摸检材通常细胞含量较少, 如何从相关载体上收集转移到足够多的脱落细胞, 对检验成功是至关重要的.本文涉案检材均为表面积较大且质地坚硬光滑的类型, 采用了干湿两步擦拭法[1]进行提取.触摸检材因接触人员的复杂性, Wickenheiser[2]研究认为皮肤接触部位的脱落细胞松散地结合在物体表面, 第二次接触会把第一次接触者的细胞蹭掉, 留下第二次接触者的细胞, 对微量DNA进行检验, 一般获得的DNA图谱以最后的接触者为主, 这也使从涉案物品上检出嫌疑人的DNA成为可能.

本文建立的改良硅珠法, 可获得高纯度DNA[3, 4], 同时具有以下合理设计:① 使用具有过滤杂质功能的离心套管, 操作更为简便, 去除杂质和模板保留效果理想; ② 降低了硅珠悬浊液的用量, 使DNA更容易洗脱; ③ 简化漂洗, 减少了漂洗过程中的DNA损耗; ④ 小体系洗脱, 进一步提高了模板DNA的浓度; ⑤ 根据报道[5, 6], 高纯度DNA辅以适当增加PCR循环数, 可以极大提高扩增成功率, 本文实验增加PCR循环数至30个.从整体上简化了实验操作, 降低了模板DNA的损耗量, 提高了检材检出率, 也印证了硅珠法改良后在微量物证检验中的应用价值.

本文1025例检材绝大部分为实物提取送检, 更利于实验室人员视情况采用更为合理的提取方法, 最大程度的进行脱落细胞转移.时间, 湿度, 温度, 光照, 微生物等不利环境因素会加速DNA的降解, 对触摸检材影响更大, 故提取后妥善保管和及时送检亦为保证检材检出数据的重要环节, 进而更好的发挥触摸检材的科学证据作用.

表 1 1025例检材检验情况统计 Table 1 Statistical data for the analysis of 1025 samples

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Gill P, Whitaker J, Flaxman C, et al. An investigation of the rigor of interpretation rules for STRs derived from less than 100pg of DNA[J]. Forensic Sci Int, 2000, 112(1): 17-40. [本文引用:1]
[2] Wickenheiser R A. Trace DNA: A review, discussion oftheory , application of the transfer of trace quantities of DNA through skin contact[J]. J Forensic Sci, 2002, 47(3): 442-450. [本文引用:1]
[3] 王林生, 苏勇, 顾林岗. 硅珠法提取PCR模板DNA[J]. 中国法医学杂志, 2000, 15(1): 36-37. [本文引用:1]
[4] 董迎春, 孙伟, 刘宗伟. 刀具水浸4天DNA检验1例[J]. 中国法医学杂志, 2014, 29(2): 176. [本文引用:1]
[5] 陈连康, 王德明, 顾丽华, . PCR扩增循环数与低拷贝DNA的STR分型[J]. 中国法医学杂志, 2005, 20(3): 149-151. [本文引用:1]
[6] 严江伟, 唐晖, 王静, . DNA提取方法和PCR循环次数对STR扩增成功率的影响[J]. 中国法医学杂志, 2005, 20(3): 151-153. [本文引用:1]