佐匹克隆快速检验
赵海雨, 阚旭升
辽宁省刑事科学技术研究所,沈阳 110032

作者简介:赵海雨(1980—),男,工程师,学士,研究方向为毒物检验。 E-mail:molemoya@gmail.com

摘要

利用电喷雾液质联用法快速检验血中佐匹克隆。少量血液样品采用乙腈沉淀蛋白后直接取上清液进样,使用Allure PFP Propyl(5μm,100mm×2.1mm)柱,流动相:乙腈:10mmol/L 乙酸铵-0.1%甲酸缓冲液=70:30进行分离,经电喷雾离子源正离子化后通过三重四级杆质谱多反应监测(MRM)对佐匹克隆(m/z 389.3/345.4和m/z 389.3/245.2)进行定性分析。被害人血中检出佐匹克隆成分。液质联用法检验血中佐匹克隆快速、准确、简单,可用于案件中检测血中佐匹克隆成分。

关键词: 法医毒物分析; LC/MS/MS; 快速检验; 佐匹克隆
中图分类号:DF794.1 文献标志码:B 文章编号:1008-3650(2015)02-0164-02 doi: 10.16467/j.1008-3650.2015.02.021
Rapid Detection of Zopiclone
ZHAO Hai-yu, KAN Xu-sheng
Liaoning Institute of Forensic Science, Shenyang 110032, China
Abstract

Zopiclone, one kind of new generation of sedative-hypnotic of the cyclopyrrolone compounds, has different chemical structures and different pharmacological function from that of the first and second generations of the hypnagogue like barbitals and benzodiazepines. Recently, in a robbery case, the suspects utilized the zopiclone to anesthetize the victims. In our laboratory, the blood sample of the victim was treated with acetonitrile to precipitate the proteins and the supernatant was separated through an Allure PFP Propyl column (5μm, 100mm×2.1mm) with the mobile phase containing acetonitrile (diluted to 70% by the buffer of 10mmol/L ammonium acetate mixed with 0.1% formic acid). The AB Sciex 4000Qtrap mass spectrometer equipped with an electro-spraying ionization source was used to detect two ion combinations of m/z 389.3/345.4 and m/z 389.3/245.2 by multiple reaction monitoring (MRM) for qualitative analysis of zopiclone. Finally, zopiclone was detected in the blood of the victims.

Keyword: forensic toxicological analysis; LC/MS/MS; quick detection; zopiclone

佐匹克隆(zopiclone)是新一代环吡咯酮类镇静催眠药, 纯品佐匹克隆是白色至淡黄色结晶或结晶性粉末, 无臭, 味苦, 易溶于二甲亚砜或氯仿, 较易溶于醋酸, 较难溶于甲醇、丙酮或乙腈, 极难溶于乙醚或异丙醇, 几乎不溶于水, 熔点178℃。佐匹克隆具有与巴比妥、苯二氮卓等一二代安眠药完全不同的化学结构而发挥不同的药理学作用, 尤其对正相睡眠第三、五期的作用, 它吸收迅速、很快分布于大脑, 血浓度到达峰值快, 下降也快, 故安全而高效[1]。由于该药物见效快, 基本无耐药性和依赖性等优点近年来使用越加广泛。本文对一起犯罪嫌疑人采用佐匹克隆进行麻醉抢劫案件进行检验, 报道如下:

1 材料与方法
1.1 仪器和试剂

Agilent 1200系列液相色谱仪(包括四元泵、在线真空脱气机、柱箱等); AB Sciex 4000Qtrap三重四级杆质谱仪; Eppendorf 5810R高速离心机。0.22µ m有机系针头过滤器(Shimadzu); 乙腈, 色谱纯(Fisher); 醋酸铵, 色谱纯(Dikma); 甲酸, 色谱纯(Dikma)佐匹克隆标准品(中国药品生物制品检定所)。

1.2 仪器条件

色谱条件:色谱柱:Allure PFP Propyl(5μ m, 100mm× 2.1mm); 流动相:乙腈:10mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸缓冲液=70:30。柱箱温度为30℃, 进样量为5μ L。

质谱参数:电喷雾电离, 正离子模式(ESI+)。操作参数分别为:碰撞气(Collision Gas)High; 气帘气(Curtain Gas)20; 离子喷射电压( Ion spray Voltage)5500V; 温度(Temperature)450℃; 雾化气(GAS1)50; 辅助加热气(GAS2)55。多反应监测模式(MRM)测定389.3/345.4和389.3/245.2两对离子。

1.3 样 本

取被害人血样200μ L, 用2mL乙腈稀释并沉淀蛋白, 充分震荡、离心后, 取上清液过0.22µ m有机系针头过滤器后装瓶待测。

2 结果与讨论
2.1 结 果

检材的多反应监测(MRM)结果如图1, 100ng/mL标准品佐匹克隆多反应检测结果如图2。如图所见, 检材中不仅同时出现389.3/345.4和389.3/245.2两对离子对且保留时间与标准品佐匹克隆保留时间一致, 可以确认含有佐匹克隆成分。

图1 血液样品多反应监测图Fig.1 MRM chromatogram of victim’ s blood sample

图2 100ng/mL佐匹克隆标准品MRM图Fig.2 MRM chromatograms of 100ng/mL standard zopiclone

2.2 讨 论

近半年来本实验室陆续遇到几起麻醉抢劫案件中检出佐匹克隆成分, 由于该药物的使用越发广泛, 可以预见今后该类案件仍将继续发生。由于佐匹克隆在亲核溶剂中容易分解, 因此在案件检验中应尽量避免使用甲醇、乙醇等亲核溶剂而采用乙腈、丙酮等溶剂[2]。实验考察了XDB C18、Ultra C18、Allure PFP Propyl等色谱柱采用不同配比甲醇:醋酸铵-甲酸缓冲液和乙腈:醋酸铵-甲酸缓冲液溶液流动相, 发现使用Allure PFP Propyl色谱柱, 流动相为乙腈:10mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸缓冲液=70:30时峰形较好, 分析时间较快。利用三重四级杆质谱的高灵敏度和选择性, 对于麻醉抢劫案件所送的血和尿等生物检材可以直接使用乙腈简单进行前处理后检测, 方法快捷准确, 十分适宜实验室日常检验工作。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 孟朝阳. 新一代安眠药“忆梦返”的性质及检测[J] . 光谱实验室, 2003, 20(3): 471-474. [本文引用:1]
[2] 利越, 马治平, 杨召雨, . 几种溶剂对佐匹克隆检验的影响[J] . 广东公安科技, 2009, 94(1): 19-20. [本文引用:1]