材料均来自于日常受理的实际案件82例:螺丝刀、菜刀、水果刀等刀柄26个, 塑料袋16个, 打火机18个, 电源线插头22个。

取96孔板, 每孔中加入10μ L去离子水, 用湿棉棒分别擦拭塑料袋、电源线、打火机、刀柄等检材, 分别剪取棉签表面约0.3cm× 0.4cm大小依次放入96孔板中, 每管中加入10μ L扩增液, 扩增引物采用AB公司提供的Identifiler Direct试剂盒, 扩增循环数为28个循环, 扩增与检测方法参照说明书。得到结果见表1和图1, 图2。

表1

表1

表1 直扩法检验82例案件样品结果 检材名称 数量 STR分型成功数 检出率(%) 刀 柄 26 10 38.5 塑料袋 16 7 43.8 打火机 18 9 50 电源线 22 10 45.5 总计 82 36 43.9 注:STR分型成功是指样本分析图谱清晰, 获得13个以上STR分型基因座

表1 直扩法检验82例案件样品结果

图1

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	图1 某案件打火机上检出DNA的图谱

图2

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	图2 某案件水果刀柄上检出的DNA图谱

由于光滑载体上遗留的接触DNA量少, 用常规DNA提取步骤较多, 难免会出现DNA丢失, 因此检出率不高。而直扩法可以直接对转移的脱落细胞进行扩增, 避免丢失DNA, 大大提高了检验成功率。由于肉眼无法判断接触DNA在物体表面的位置, 因此, 要求尽量原物送检, 视检材大小结合生活经验及现场情况分区域转移。转移范围要适度, 转移范围过大, PCR抑制物多, 部分样本会出现峰值前高后低现象, 峰型不均衡或出峰不全, 影响图谱的观察, 且可能出现污染或混合数据; 转移范围过小则可能因为收集的细胞过少而检不出。

该法操作简便、节省时间、检出率高, 但也有局限性, 对于一些需进一步检验的样品, 比如增加位点数, 或加扩Y用于父系排查, 或需要调整模板浓度重新扩增等工作, 直扩法由于没有DNA模板则无法进行; 对于比较脏、污染严重的载体, 由于PCR抑制剂较多, 不适用该方法。