案例1 某年4月, 某县幼儿园的50多名学生出现皮下出血等不同症状, 部分较为严重的学生出现鼻出血、口腔出血不止等症状。
案例2 某年4月, 董某伙同廖某向董某前男友黄某饮用的葡萄酒中投放了杀鼠剂, 几天后黄某经医院抢救无效死亡。
样本前处理:吸取中毒者全血1mL移至试管中, 加1mL20%的盐酸酸化血样, 震荡摇匀, 再加入2mL乙酸乙酯(重复提取3次), 震荡后超声提取5min, 然后离心5min, 将底层溶液吸至样品管中, 置于氮气吹干仪中吹干, 用100μ L甲醇复溶, 20μ L进样。
仪器和色谱条件:美国ABI公司API2000液相色谱-串级四极杆质谱联用仪、Turbo IonSpray离子源、岛津LC-20A高效液相色谱仪、贝克曼冷冻离心机。色谱条件:选用WATERS公司AtlantisTM dC18150mm× 3.9mm(5μ m)色谱柱; 流动相等度洗脱; 流速:0.5mL/min; 柱温35℃; 进样量20μ L, 每个样品分析用时10min, 流动相为甲醇(A)和水(含0.05%异丙胺)(B), 比例为9∶ 1。
质谱条件:采用电喷雾(ESI)离子源, 在负离子电离模式下选用多反应监测(MRM)的质谱扫描方式进行测定, 大隆的母/子离子对的质荷比为:521.2→ 78.9/135.3, 523.1→ 80.5/135.3, 大隆的分子式中含有溴, 因此, 在质谱上表现为两个明显的同位素峰。
大隆这类鼠药为大分子量化合物、常压下难以气化, 高于200℃会分解, 不适宜用气相或气质联用仪进行分析鉴定。该类药物摄入体内可破坏机体的凝血功能和损坏微小血管, 引起内出血[1], 案例2黄某在怀疑被投毒后, 即进入当地医院进行治疗, 由于开始两天并无明显症状, 第4日凌晨突然出现血尿、流鼻血、口腔出血等症状, 经抢救无效死亡。法医检验黄某尸体发现, 其肝脏、肺等器官均有明显出血现象。目前对大隆的检测大多采用HPLC法[2]、紫外导数光谱法进行检验, 也有采用液质联用法[3]分析大隆的报道。由于该类药物潜伏期较长, 等到中毒者出现明显症状时, 中毒者血液中的大隆经过代谢以后, 含量已经减少, 给检验工作带来很大困难。
由于大隆为酸性药物, 为了增加检验方法的灵敏度, 在方法建立的过程中, 采用向流动相中加入异丙胺的方法, 使流动相呈碱性, 这样就更有利于大隆的电离。与采用中性流动相相比, 向流动相中加入异丙胺后, 仪器的灵敏度可以增加十倍以上。因此, 当实验室的仪器(本实验室仪器为美国ABI公司API2000液相色谱-串级四极杆质谱联用仪)较为落后, 灵敏度低时, 可以采用调节流动相酸碱度的方法加以解决。
目前尚未见香豆素类杀鼠剂在人体内毒物代谢动力学的报道。在某县幼儿中毒的案例中, 中毒幼儿从中毒到抽血送检间隔时间10d以上, 但仍在血液中检出大隆。虽然大隆中毒潜伏期3d~5d, 死亡高峰期4d~6d, 但由于大隆性质稳定, 在活体内与相应受体蛋白结合紧密, 代谢排泄较慢[3], 所以在发案较长时间后仍能从血液中检出大隆, 这也为该类中毒案件检测并获取相关重要证据提供了可能。
The authors have declared that no competing interests exist.
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