某年8月23日, 接群众报警:某镇一出租屋里有一男子死亡, 经查该男子是在该出租屋内嫖娼猝死。

取该男子血样FTA卡, 采用Identifiler_Plus STR试剂盒直接扩增。根据Identifiler_Plus STR试剂盒扩增的DNA分型结果显示:该男性个体的STR分型的Amelogenin基因座上仅检测到X特异谱带(见图1)。

图1

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	图1 猝死男子Identifiler_Plus试剂盒扩增的STR分型结果

采用AmpFISTR^○RMinifiler试剂盒扩增, 分型结果显示:该男性个体的STR分型的Amelogenin基因座上仅检测到X特异谱带(见图2)。

图2

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	图2 猝死男子Minifiler试剂盒扩增的STR分型结果

采用AmpFISTR^○RYfiler试剂盒进行扩增和ABI 3130基因遗传分析仪检测, GeneMapperID V3.2软件进行Y-STR分型获得全部Y-STR分型(见图3)。

图3

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	图3 猝死男子Yfiler试剂盒扩增的Y-STR分型结果

经查该男子婚后育有一子, 取其子黄某血样进行上述检验, 结果显示:黄某STR分型的Amelogenin基因座上也仅检测到X特异谱带(见图4, 图5), 而Y-STR分型也获得全部分型(见图6)。

图4

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	图4 黄某Identifiler_Plus试剂盒扩增的STR分型结果

图5

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	图5 黄某Minifiler试剂盒扩增的STR分型结果

图6

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	图6 黄某Yfiler试剂盒扩增的Y-STR分型结果

导致基因缺失的原因大致有3种:(1)引物结合区靠近3'端发生突变, 引物扩增效率受到严重影响; (2)某些PCR抑制剂特异酶导致扩增失败; (3)大段的基因组DNA缺失。前2种原因都可以采取不同的技术措施进行克服, 但第3种原因是无法通过技术手段克服的。针对第1种原因本实验室采用不同引物设计的Identifiler_Plus试剂盒和MiniFilre试剂盒分别检验, 均出现Amelogenin-Y未检出, 可以排除第1种情况。由于本案所检测样本均为FTA卡提取的血痕, 提取时采用0.5mm× 0.5mm的血卡尽量减少血红蛋白等抑制物, 检测出的峰值达到1500ruf以上, 所以不存在抑制物的问题。

由于猝死男子与其子黄某Amelogenin基因座上仅检测到X特异谱带, 而使用针对Y染色体上特异的STR基因座检验的Yfiler试剂盒获得了分型, 此父子俩的Amelogenin-Y未检出, 应为第3种原因等位基因缺失所致。

Amelogenin是编码牙釉蛋白的基因。英国法庭科学服务部(ESS)最早设计特异PCR引物, 大多数情况下, Amelogenin是生物样本性别分型的有效方法, 但是结果不是完全可靠。印度人群中, Y染色体Amelogenin缺失比欧洲人群更常见, 澳大利亚DNA数据库中3万男性的研究显示有6名个体无Y染色体Amelogenin扩增产物。Y染色体Amelogenin的稀有缺失可导致无法得到Y染色体扩增产物。这时候男性样本可能会错误地被认为是女性样本。这些样本可通过Y-STR检测和扩增SRY区域确认为男性。在日常办案中, 如果案件信息提示的是男性, 而STR检测结果显示是女性时要慎重对待, 可以通过检测Y-STR进行识别(备注:经与试剂商美国应用生物系统公司中国公司联系, 确认Identifiler_Plus试剂盒和MiniFilre试剂盒的引物序列设计不同, 但因涉及商业秘密不予公开。详细可参考Identifiler_Plus试剂盒和MiniFilre试剂盒说明书)。