胶体金技术检测ABO血型的应用
[郝金萍1 
, 金鑫2 , 周毅1 , 尹文宁3 , 杨智4 ]
, 金鑫引用本文
郝金萍, 金鑫, 周毅, 尹文宁, 杨智. 胶体金技术检测ABO血型的应用[J]. 刑事技术,2014,39(2): 17-18
HAO Jin-ping, JIN Xin, ZHOU Yi, YIN Wen-ning, YANG Zhi. Application of colloidal gold test strip for forensic blood grouping[J]. Forensic Science and Technology,2014,39(2): 17-18
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HAO Jin-ping, JIN Xin, ZHOU Yi, YIN Wen-ning, YANG Zhi. Application of colloidal gold test strip for forensic blood grouping[J]. Forensic Science and Technology,2014,39(2): 17-18
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胶体金技术检测ABO血型的应用
作者简介:郝金萍(1978—),女,山西太原人,副主任法医师,硕士,主要从事法医物证案件检验及相关研究工作。Tel:010-66269472; E-mail:hao-haoho@163.com
摘要
目的 研制能使陈旧生物斑迹中所含的ABO血型物质快速溶解的稀释液,利用胶体金技术快速检验法医学中常见的陈旧的生物斑迹的ABO血型表现型。方法 溶解生物斑迹中所含的ABO血型物质,利用ABO血型胶体金试剂条,检测72份已知血型的志愿者的血斑、唾液斑以及2份案件中的陈旧血斑(18年前)。结果 72份志愿者及陈旧血斑的ABO血型分型正确、检验快速、操作简便。结论 该方法可用于检测法医中常见的陈旧的生物斑迹的ABO血型表现型。
关键词:
胶体金试剂条; ABO血型表现型; 陈旧生物斑迹; 法庭科学
中图分类号:DF795.1
文献标志码:A
文章编号:1008-3650(2014)02-0017-02
Application of colloidal gold test strip for forensic blood grouping
Abstract
Objective To develop a blood diluent for aged bloodstain grouping by using colloidal gold test strip.Methods 72 volunteers' blood and saliva stains and 2 eighteen years old case samples were treated with developed diluent and then tested by strip of colloidal gold.Results The ABO blood groups of 72 volunteers and 2 aged case samples were obtained correctly.Conclusion This method is easy to operate and can be used for detection of ABO blood groups in forensic science.
Keyword:
gold-labeled strip; ABO blood group; aged blood stain
在法庭科学领域, 利用胶体金法检测人血红蛋白以及人前列腺特异性抗原, 从而确证人血及人精斑的试验已经广泛使用[1]。但是利用胶体金法检测血斑、唾液斑、精斑等实际案件检验中常见的生物斑迹的ABO血型表现型则尚未开展。目前, 主要使用血凝试验对新鲜的红细胞悬液进行ABO血型分型检验, 若遇到血斑、唾液斑, 尤其是法医实际办案中常见的陈旧的生物斑迹时, 则没有有效的ABO血型表现型快速分型方法。
1 材料和方法
1.1 材 料
样品:72份志愿者的血液及唾液样本为新鲜提取, 滴在纱布上制成斑迹; 2份陈旧血斑(18年前)为实际案件中的检材。
材料:样品稀释液(自制)、ABO血型检测金标试剂条(北京康斯尔泰医学科技发展中心, 北京)。
1.2 方 法
取0.3cm2血斑或唾液斑, 剪碎后置于试管中; 在试管中加200μ L样品稀释液, 溶解5min , 震荡混匀; 检验前将试剂条从袋子中取出, 如有冷藏保存的, 必须平衡到室温, 平置于台面上; 吸取100μ L待检样本, 加入到试剂条的加样孔中, 10min后观察结果。
2 结 果
72份志愿者的血斑和唾液斑经检验, 均得出了与原先一致的血型结果。2份陈旧的已知血型的案件检材(18年前血斑)也得到了一致的血型检验结果(见图1、图2)。
 | 图1 唾液斑的血型检验结果 |
 | 图2 18年前的陈旧血斑 |
3 讨 论
该胶体金试剂条是利用免疫组化的方法检测ABO血型表现型, 该方法出结果快而且直观[2]。待检样品经样品稀释液浸泡溶解后, 将稀释液滴加到试剂条的加样孔中, 样品中的A型、B型抗原与试剂条上胶体金标记的抗A、抗B抗体发生特异性结合, 形成携带胶体金的抗原抗体复合物, 在层析作用下, 该复合物沿硝酸纤维素膜试纸向前移动, 当移动至底物区时, 抗原抗体复合物被硝酸纤维素膜上预埋的特异性底物所捕获、富积, 由于胶体金的特殊作用, 在试剂条上直接显示红色阳性标记带, 如果是AB型血, 出现A标记带和B标记带; A型血只有A标记带; B型血只有B标记带; O型血则没有标记带。
目前, 随着DNA技术的发展, ABO血型表现型的检验在很多法医物证实验室都已经被淘汰, 这是因为案件现场中提取到的生物斑迹比较陈旧, 而且还可能有污染, 这些都会使血型物质降解而无法得到准确的ABO血型表现型。过去使用的血凝集试验, 针对的是5%红细胞悬液或全血, 若红细胞悬液浓度过低, 那么微弱、细小的凝集就看不到, 从而造成假阴性结果。另外, 针对分泌型的吸收试验、解离试验、混合凝集试验等方法, 通过抗血清效价的变化来判断, 所以抗血清的效价必须与检材中所含凝集原的量相适应, 否则就会造成错误判型, 而且操作复杂、技术条件要求高[3], 所以目前该方法也已经被淘汰。
本研究中的胶体金试剂条以及自制的样品稀释液可以快速、准确获得血斑、唾液斑的ABO血型表现型, 检验时间短, 不影响后续的DNA检验; 而且能够适用于陈旧的生物学斑迹。因此可以适用于法庭科学中的日常检案。
The authors have declared that no competing interests exist.