许多研究者采用醋酸酐衍生, 与其它衍生物相比, 乙酰基相对较小, 衍生物的质谱特征强, 干扰少。Kraeme等^[9]研究了氯丙苯丙胺及其在体内的代谢物苯丙胺, 对尿液样品进行酸性水解, 萃取, 醋酸酐衍生, GC-MS分离检测, 氯丙苯丙胺和苯丙胺的检出限分别为50ng/mL和100ng/mL, 在服用氯丙苯丙胺32h~68h后, 仍能检测出苯丙胺。陈朝阳等^[10]人采取血浆、肝组织, 加入丙基解痉素, NaOH消解, 硼酸缓冲液调节pH至10, 乙醚4mL提取两次, 水浴加热挥干溶剂, 三氟乙酸(TFA)衍生化, 乙醇定容, GC-MS分析检测了血浆中的AMP、MAM、MDMA, 其线性范围为0.02μ g/mL~2.0μ g/mL, 最低检出限0.005μ g/mL; 肝组织中AMP、MAM、MDMA的线性范围为0.05μ g/mg~5.0μ g/mg, 最低检出限0.010μ g/g。回收率在92.1%~105.2%之间。本实验回收率高, 重复性好, 提供了一种快捷、实用、有效检测苯丙胺类毒品的方法。王玉瑾等^[11]人采取血清及尿液样品1mL, 加入丙基解痉素, 硼酸缓冲液2mL, 乙醚5mL提取2次, 水浴挥干, 残渣加入乙酸乙酯、TFA各25μ L, 衍生化后用30μ L甲醇定容, GC-MS分析检测。AM、MAM在血清中的线性范围为0.01mg/L~5.0mg/L, 尿液中为0.1mg/L~50 mg/L; 回收率在95.50%~103.16%之间。此方法检测灵敏度高、重复性好, 适用于临床苯丙胺类毒品中毒的快速鉴定。

孟品佳^[12]考察了用N-甲基双三氟乙酰胺(MBTFA)衍生3, 4-亚甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA), 当两者用量比例为1μ L∶ 1μ g时, 衍生化完全, 其检出限为0.06ng。另一研究中身体健康志愿者服用100mgMDMA, 提取其血浆和尿液样本, 水解后固相萃取, 用含有2%氨水的乙酸乙酯洗脱, 40℃下氮气浓缩; 萃取液用50μ LMBTFA于70℃下衍生20min, GC-MS检测。MDMA的线性范围为25ng/mL~400ng/mL, 其代谢物MDA、HMMA、HMA的线性范围为2.5ng/mL~40ng/mL、250ng/mL~2000ng/mL、100ng/mL~1000ng/mL。此方法线性范围良好, 挥发损失少, 提高了检测的准确性和灵敏度^[13]。

研究人员还成功地将其它衍生试剂用于苯丙胺类毒品的衍生化, 包括五氟丙酸酐(PFPA)、七氟丁酸酐(HFBA)、全氟辛酰氯以及乙氧基羰基六氟丁酰氯(GB)等。Valentine等^[14]让十名志愿者口服剂量30mg/70Kg的右旋甲基苯丙胺, 以服药前空白尿液作比对, 用五氟丙酸酐衍生萃取物, GC-MS分析检测。甲基苯丙胺的回收率约为20%, 其代谢物苯丙胺约为2%; 尿液中甲基苯丙胺的含量在4h~6h时达到最高, 随后逐渐下降, 7天内仍能检出。Thurman等^[15]从尿液中提取苯丙胺、甲基苯丙胺和拟交感神经胺类药物麻黄碱、六氢脱氧麻黄碱、伪麻黄碱、去甲麻黄碱、间羟基去甲麻黄碱、去氧肾上腺素、苯丁胺、3, 4-亚甲二氧基苯丙胺(MDA)及3, 4-亚甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA), 用七氟丁酸酐(HFBA)衍生化, GC-MS选择离子分析检测。由于这类物质具有相同结构, 裂解后会产生相同离子, 当选择苯丙胺m/z 240和甲基苯丙胺m/z 254为检测离子, 可以将苯丙胺、甲基苯丙胺与拟交感神经胺类区分开。

Valentine等^[16]建立了一种快速鉴别尿液中拟交感神经胺类的方法, 这些拟交感神经胺包含伯胺、仲胺、肼和羟基基团, 10%氟代酸酐衍生化, 氟代酸酐包括三氟乙酸酐(TFAA)、五氟丙酸酐(PFPA)、七氟丁酸酐(HFPA)。拟交感神经胺类的TFAA和PFPA衍生化产物的保留时间与原体化合物基本相同, 而HFPA衍生物的保留时间显著推后。进样口温度设定为260℃, HFPA衍生化, 可以提高色谱分辨率和灵敏度, 使离子碎片丰度达到最高。0.1 mL样本尿液添加苯丙胺-d₅和甲基苯丙胺-d₅作为内标, 然后用硼酸盐缓冲液调节pH值至9.3, 用9∶ 1的氯仿∶ 异丙醇离心萃取, 分离有机相, 加入10%的甲醇盐酸, 在氮气氛围下蒸发, 在进样口用HFBA试剂衍生, GC-MS分析。所建立的方法适用于临床毒理学分析的尿液样品检测。

Gjerde等^[17]建立了检测血液中苯丙胺和甲基苯丙胺的定量方法, 用环己烷萃取血液样本, 全氟辛酰氯衍生, GC-MS选择离子扫描。苯丙胺和甲基苯丙胺的线性范围分别为14mg/L~2700mg/L和15mg/L~3000mg/L, 最低检出限为11mg/L和13mg/L, 定量限为22mg/L和34mg/L, 误差率为5%和8%。在腐败的血液样本中, 只有苯丙胺中的m/z 118检测受到干扰, 甲基苯丙胺和苯丙胺的其它检测离子均未受到干扰。

孟品佳^[3]2考查了MSTFA和MBTFA对苯丙胺类中的极性基团氨基和羟基的衍生化效果, 发现MSTFA未能将苯丙胺类毒品完全衍生化, 而MBTFA可将其完全衍生。

Scheper等^[18]人让8名志愿者每日口服10mg S-(+)-MDMA盐酸盐4次, 服用7天, 停用三周后, 其中的5名志愿者每日口服20mg S-(+)-MDMA盐酸盐4次。分别采集1mL唾液和血液, 加入100μ L 1μ g/L的内标溶液(MDMA-d₁₁和AM-d₁₀)和3mL 2.0mol/L醋酸钠缓冲液(pH4.0), 离心分离5min, 取上层清夜, 用1mL含有二氯甲烷、异丙醇、14.5mol/L氨水(体积比为80∶ 20∶ 2)预处理Clean Screen^® 固相萃取柱, 萃取后依次用两份1mL去离子水、1.5mL 0.1mol/L的盐酸溶液、两份1mL甲醇清洗柱表面, 固相萃取柱干燥后用1mL含有二氯甲烷、异丙醇、14.5mol/L氨水(体积比为80∶ 20∶ 2)洗脱4次, 向洗液中加入20μ L含有1%特丁基二甲基氯硅烷(TBDMCS)的N-(叔丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺(MTBSTFA), 80℃衍生45min, GC-MS分析。结果表明在第一次口服剂量后, 0.25h~2h内在血液中发现MDMA, 浓度在14.5μ g/Lμ g/L~33.8μ g/L(口服10mgMDMA)之间, 在2h~12h内发现MDMA, 浓度在26.2μ g/L~44.3μ g/L(口服20mgMDMA)之间。唾液检测表明在0.08h~2h内发现MDMA, 浓度在24.7μ g/L~312.2μ g/L(10mg)和75.3μ g/L~321.7μ g/L(20mg)之间; 血液中MDMA在2h~24h内含量变化显著, 在24h时志愿者血液中MDMA含量为7.3± 5.5μ g/L, 唾液中为18.8 ± 18.0 μ g/L。虽然尿液可检测高浓度分析物, 提供较宽的检测窗口, 但尿液容易掺假造成假阴性结果, 此实验检测唾液、血液可提供可靠性检测结果, 避免造成误检。

手性试剂衍生化可以影响化合物本身的性质, 以便进行选择性操作(如对映体分离); 苯丙胺类毒品有一个不对称中心, 有两种对映体, 这两种对映体生理活性截然不同, 但是在一般的分析方法(如气相色谱和液相色谱)中表现相同。分离鉴别对映体的方法, 一是用含有与对映体作用的固定相色谱柱, 达到分离目的。手性分析GC柱用于对映体分离, 尽管有效, 但是该方法也有缺点。手性柱比非手性柱价格贵, 在GC高温环境下, 手性柱的性能更易下降, 因此更换频率高, 造成分析成本高。另一种对映体分析方法是使用手性衍生化试剂, 将对映体转变为非立体异构体, 用标准色谱柱分离检测。

常用的苯丙胺类手性试剂是N-三氟乙酰-l-脯氨酰氯(l-TPC)、五氟丙酰-l-脯氨酰氯(l-PPC)和七氟丁酰-l-脯氨酰氯(l-HPC)。Hensley等^[19]建立了一种同时测定尿液中l-和d-的AM、MAM、MDA、MDMA、MDEA的方法, 实验采用液-液萃取, l-TPC衍生, GC-MS分析。当尿液中AM和MAM的含量大于或等于10ng/mL, MDA、MDMA和MDEA的含量大于或等于25 ng/mL时, 该方法可提供准确和可靠的检测结果。8名被测者尿液中l-MDMA的百分含量最高; d-MDA的最初含量高于l-MDA, 随时间的变化, 尿液中l-MDA的含量逐渐增加, 在服药后36h, l-MDA含量超过d-MDA。张建新等^[20]研究了甲基苯丙胺对映异构体衍生化方法, 在碱性条件下用1-氯丁烷萃取甲基苯丙胺, 然后用(S)-(+)-α -(三氟甲基)苯基乙酰氯[(S)-(+)-α -MTPACl]直接衍生化, GC-MS分析MTPA-MDMA非对应异构体为主要产物, 不受其它峰影响, 分离效果好, 在2ng/mL~80ng/mL范围内线性良好, 检出限0.0016ng。有学者还研究了(-)N-三氟乙酰-l-脯胺酰氯(TPC)对苯丙胺类毒品的手性衍生化, 发现衍生产物不稳定, 不适宜于对映异构体的定量分析。Shin等^[21]用手性衍生化试剂α -甲氧基-α -(三氟甲基)苯乙酰氯将苯丙胺对映体衍生化, 在衍生化前, 先用N-甲基-N-甲硅烷基酰胺将苯丙胺盐酸盐转化成苯丙胺, 将羟基甲硅烷化, 衍生化反应迅速, 能立即进行GC-MS选择离子扫描检测。此方法可以应用于生物检测中苯丙胺的定量分析。

衍生化改变了苯丙胺类毒品的挥发性, 在用气相色谱分析这些化合物时, 由于它们的保留时间比未衍生的化合物更长, 衍生的药物更容易和其它化合物分离; 苯丙胺类毒品的GC分离易产生拖峰现象, 而衍生物的色谱行为变好, 能产生更好的峰形。而且衍生化使苯丙胺类毒品产生了高特异性的离子碎片峰, 有利于确定毒品成分, 提高检验鉴定效率。