引用本文
熊昌艳, 郭书华, 王永忠, 孙瑞清. 脂肪栓塞中苏丹Ⅲ染色的定量分析[J]. 刑事技术,2013,38(5): 25-26
XIONG Chang-yan, GUO Shu-hua, WANG Yong-zhong, et al. Quantitative analysis of sudan Ⅲ staining in identification of fat embolism[J]. Forensic Science and Technology,2013,38(5): 25-26  
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《刑事技术》编辑部
脂肪栓塞中苏丹Ⅲ染色的定量分析
熊昌艳1,2, 郭书华3, 王永忠1,2, 孙瑞清2
1.江苏大学法医学教研室,镇江 212013
2.江苏大学司法鉴定所,镇江 212001
3.江苏大学附属医院急诊中心,镇江 212001

作者简介:熊昌艳(1981—),男,湖北公安人,讲师,博士研究生,主要从事法医学教学、科研及鉴定工作。E-mail:xiongcy@ujs.edu.com

摘要

目的探讨苏丹Ⅲ染色如何定量应用于脂肪栓塞的法医学鉴定。方法应用苏丹Ⅲ对11例肺脂肪栓塞猝死的案例和11例其他原因致死的案例进行染色,并结合统计学方法对脂肪栓塞的阳性面积百分率及脂肪栓子数进行定量分析。结果脂肪栓塞致死者肺内苏丹Ⅲ染色阳性面积百分率为(5±1.7)%、脂肪栓子数为(9±2.4)%,均远大于其他原因致死的案例( P<0.01)。结论苏丹Ⅲ染色法定量分析在脂肪栓塞中的法医学鉴定上结果可靠。

关键词: 法医病理学; 苏丹Ⅲ染色; 脂肪栓塞
中图分类号:DF795.1 文献标志码:A 文章编号:1008-3650(2013)05-0025-02
Quantitative analysis of sudan Ⅲ staining in identification of fat embolism
XIONG Chang-yan, GUO Shu-hua, WANG Yong-zhong, et al
Department of Forensic Medicine, Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China
Abstract

Objective To investigate the quantitative use of fat embolism by Sudan Ⅲ staining in forensic identification. Methods 11 cases of pulmonary embolism and sudden unexpected death with 11 cases of other causes were studied and the percentage of the positive area of fat embolism and the number of fat emboli were analyzed quantitatively. Results For the death coursed by pulmonary embolism, the percentage of positive staining area is (5±1.7) %, and the number of fat emboli is (9±2.4) %. A comparison with other causes of death has significant differences ( P<0.01). Conclusion Quantitative Analysis of fat embolism in forensic identification is credible and practical.

Keyword: forensic pathology; Sudan Ⅲ staining; fat embolism

在法医学鉴定实践中, 四肢长骨骨折导致肺脂肪栓塞猝死的案例时有发生。确定脂肪栓塞常采用冰冻切片苏丹Ⅲ 染色法。其他原因致死的案例也时常检见少量脂肪栓子, 说明也存在脂肪栓塞, 但尚不构成死因。故在法医学鉴定中, 要对脂肪栓子进行定量计算后才可应用在脂肪栓塞致死的死因分析上。本文回顾性研究通过比较脂肪栓塞致死案例与有脂肪栓塞但系其他原因致死案例的苏丹Ⅲ 染色, 应用统计学方法分析染色的阳性面积百分率及脂肪栓子数, 以期为苏丹Ⅲ 染色法在脂肪栓塞中的法医学鉴定提供客观依据。

1 材料与方法
1.1 材料来源及处理

因脂肪栓塞致死的肺组织检材11例均取自多发性骨折后, 作为脂肪栓塞致死组包括:股骨粗隆间及股骨颈骨折2例; 股骨干骨折合并尺、桡骨折2例; 股骨干骨折合并胫腓骨及骨盆骨折4例; 胫、腓骨骨折1例; 肱骨骨折合并尺、桡骨骨折及多发性肋骨骨折2例; 另取11例有脂肪栓塞但系其他原因致死的案例作为其他原因致死组。每个案例取近肺门处组织5块, 各肺叶1块, 一半做石蜡切片, 另一半做冰冻切片, 取心肌被膜下脂肪组织做阳性对照。所取组织均经中性甲醛固定液充分固定, 组织块大小约为20mm× 15mm× 5mm。经30%蔗糖脱水后恒温冰冻切片机切片, 厚度为5μ m。

1.2 肺组织的常规HE染色

切片脱蜡, 水化; 苏木素染色5min; 在1%盐酸-酒精中分化后, 自来水中返蓝30min; 1%伊红染色3min; 梯度酒精脱水, 二甲苯透明, 中性树胶封片。

1.3 肺组织的苏丹Ⅲ 染色及结果分析

冰冻切片经70%乙醇稍洗后用苏丹Ⅲ 溶液染25min, 70%乙醇分化, 蒸馏水洗。苏木素染色数秒, 返蓝1min。甘油明胶封固。100倍光镜下观察, 随机选取10个视野, 以肺小动脉及肺泡壁毛细血管内可见较多染为桔红色的脂肪滴为阳性染色, 每个视野计算阳性面积与整个视野面积的百分率和每个视野的脂肪栓子数。用SPSS13.0统计软件对所有数据进行统计学处理, 所有数据以均数± 标准差表示, 采用单因素方差分析, P< 0.01为差异有显著性意义。

2 结 果
2.1 HE染色所见

脂肪栓塞致死组肺细动脉和毛细血管内可见大小不一的空泡充满管腔, 空泡内壁附有棕黄色结晶或颗粒, 空泡中心多不着色; 其他原因致死组也可见类似空泡, 但数量明显减少。

2.2 肺组织苏丹Ⅲ 染色所见

100倍光镜下, 观察切片中脂肪栓子面积和脂肪栓子个数的变化。结果显示, 脂肪栓塞致死组肺泡壁毛细血管内可见大量呈橘红色的脂肪栓子(见图1); 在其他原因致死组肺泡壁毛细血管内亦有极少量呈橘红色的脂肪栓子(见图2)。在脂肪栓塞致死组中, 阳性面积百分率和脂肪栓子数均明显大于其他原因致死组(P< 0.01)见表1。

图1 肺小动脉和肺泡壁毛细血管内可见大量呈橘红色的脂肪栓子 苏丹Ⅲ 染色× 100

图2 肺泡壁毛细血管内有极少量呈橘红色的脂肪栓子 苏丹Ⅲ 染色× 100

表1 脂肪栓塞致死组与其他原因致死组的阳性面积、脂肪栓子数( x̅±s)
3 讨 论

在法医检案中, 凡死前有烧伤、皮肤有大面积挫伤, 做过骨科手术或有长骨骨折、乳腺切除、油剂注射者及部分交通意外损伤的案例, 应作脂肪栓塞检查。有时脂肪肝患者发生急性肝坏死(栓子来源于脂变的肝细胞)、中毒(如四氯化碳中毒引起肝细胞脂变, 脂质从肝细胞释放入血)、分娩(损伤骨盆脂肪组织进入血循环)、减压病(因脂肪组织的迅速扩张、破裂, 栓子从脂肪组织释放)、糖尿病及严重传染病等也会发生脂肪栓塞[1]。但肺广泛的中度或显著的脂肪栓塞几乎总是生前暴力行为所致, 可以作为一个创伤后即刻死亡病例生前反应的有用指标。由于常规HE切片制片过程中, 肺内脂肪栓子可被二甲苯洗脱, 形成空泡, HE染色仅可初步诊断脂肪栓塞, 特别是镜检见有较多空泡而疑空气栓塞时, 必须经苏丹Ⅲ 染色方可确定。

本文回顾性研究通过比较脂肪栓塞致死的案例与其他案例的苏丹Ⅲ 染色, 表明脂肪栓塞致死者肺内苏丹Ⅲ 染色阳性面积百分率、脂肪栓子数均远大于其他案例(P< 0.01)。这说明通过对苏丹Ⅲ 染色阳性面积百分率和脂肪栓子数的统计分析, 可以有效区分其他死因。尽管此二指标均受取材部位、所选视野的影响, 且脂肪栓子数的计数并未考虑栓子的面积, 但事实上综合二者后得出的结论均符合案情。有实验静脉注射骨髓脂肪造成14只犬的脂肪栓塞综合征, 连续观察48h后处死, 发现肺部病变者为100%, 这说明肺组织为脂肪栓塞中的理想检材, 其受取材部位的影响较小。

案例中死者肺内脂肪栓子来源于骨折处的骨髓脂肪, 因组织压迫和静脉负压, 脂肪滴由血管或淋巴管断端侵入血液或淋巴液中[2], 影响肺泡的换气功能, 使得动脉血氧分压下降; 以及由于血小板在异物表面的破坏, 释放出激肽、5-羟色胺和组胺样物质, 引起呼吸道、肺血管痉挛, 最后出现威胁生命的动脉血低氧血症, 导致中枢神经系统受损, 出现神经系统症状[1]。但也有一些无骨损伤而出现脂肪栓塞的案例, 其脂肪栓子可能来源于血浆中乳糜微粒聚合而成的脂滴。正常时血液中的脂类呈乳糜微粒, 当机体受到严重创伤后, 应激反应使交感神经兴奋, 在神经-内分泌作用下, 儿茶酚胺血中浓度增高, 儿茶酚胺既可激活脂肪酶, 又可动员机体周围脂肪组织入血, 活化的脂肪酶使正常血脂乳化状态不稳定, 导致乳糜微粒凝结形成脂肪栓子。

其他原因致死的案例也检见脂肪栓子, 说明也存在脂肪栓塞, 但尚不构成死因。故在法医学鉴定中, 要对脂肪栓子进行定量计算才能证明因脂肪栓塞致死。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 侯树勋. 现代创伤骨科学[M]. 北京: 人民军医出版社, 2002: 604-606. [本文引用:2]
[2] Korhan Taviloglu, Hakan Yanar. Fat embolism syndrome[J]. Surg Today, 2007, 37: 5-8. [本文引用:1]