某年11月某日起, 某县城辖区内先后发生多起居委会财务室保险柜被盗撬案。勘验人员在不同的现场分别提取到螺丝刀, 金属锥体头呈“ 一” 字型2把和“ 十” 字型1把, 由于用力过度使金属锥体呈弯曲状, 送至DNA室要求检验。

DNA检验 先用生物物证提取棉签(公安部物证鉴定中心研发)“ 两步法” 擦拭“ 十” 字型螺丝刀的木质柄部上的脱落细胞, 然后用EZ-tape(公安部物证鉴定中心研发)粘取木质柄部的该部位, 将擦拭棉签和EZ-tape胶膜放入1.5mL离心管中, 编为1号检材。依照该方法再分别得到2把“ 一” 字型螺丝刀木质柄部上的脱落细胞, 编为2、3号检材。其中1号脱落细胞检材使用德国QIAGEN公司EZ1 Advanced全自动核酸纯化仪提取DNA(按说明书操作程序)。2、3号脱落细胞检材按QIAGEN公司M48磁珠法手动操作, 在离心管内加入G₂溶液290μ L和10mg/mL的PK 20μ L, 56℃保温2h以上, 离心后取上清液, 加入MTL溶液880μ L和磁珠30μ L, 充分混匀溶液, 室温放置15min(每2 min摇匀一次)。用500μ L 80%的乙醇溶液洗涤磁珠3次, 自然晾干, 加入30μ L去离子水洗脱DNA。

按照Identifiler试剂盒说明书配制PCR反应液, 其中取反应液混合物6μ L和上述模板DNA 4μ L在9700型扩增仪上标准程序进行复合扩增。扩增产物在3130XL型遗传分析仪上检测, 用GeneMapper IDv3.2软件进行STR分型。结果显示, M48磁珠法手动提取DNA得到完整分型; 而EZ1仪器提取DNA未得到完整分型, 过Microcon-100柱后得满意分型(见图1)。

图1

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	图1 A为手动M48磁珠法; B为EZ1Advanced联合Microcon-100柱法

作案工具上检出的DNA为同一人所留, 将STR分型结果录入至本市DNA数据库系统后, 与2010年4月某市一公司被盗案现场烟蒂STR分型串并, 并比中2010年5月该省某市检验入库的违法人员王某(男, 36岁)。抓获王某后, 其供述了上述多起入室盗窃保险柜案件。

通常情况是接触性检材人体脱落细胞含量较少, 而实际工作中大量可疑载有人体脱落细胞的接触性检材越来越受到重视, 如何在承载载体上转移富集到足够的靶细胞和成熟得当的检验方法非常关键。

第一是转移富集靶细胞, 针对不同的客体使用不同的转移方法。常规做法是渗透性客体使用生物细胞提取仪(公安部物证鉴定中心), 如衣服织物等; 而非渗透性客体使用生物物证提取棉签或EZ-tape胶带, 有时根据客体是否光滑及光滑程度交叉联合使用棉签、EZ-tape和生物细胞提取仪、EZ-tape^{[1, 2, 3]}, 棉签“ 二步法” 擦拭时, 先用半湿润的一支, 再用干燥的一支。第二是DNA检验方法。一方面提取方法的选择, 无污染抑制物的检材可以用小体积Chelex-100+PK法, 其它的用磁珠法, 直接剪取的衣物布片和大面积的擦拭则用大体积硅珠法; 另一方面操作方法的选择, 可以使用仪器, 也可以手动, 目前国内市场上有很多DNA提取的仪器, 根据情况可以建立适合自己实验室的仪器程序。如果STR分型不完整, 附带用Microcon-100浓缩柱会得到满意的分型。第三是扩增体系, 在日常检案中, 一般习惯于10μ L体系, 磁珠法提取的DNA无干扰和抑制物, 因此模板用4μ L, 可以保证PCR扩增效率。在本案中, 正是基于这些考虑, 统筹安排检验程序, 合理选择适合的方法, 最终在人接触的螺丝刀木柄部位均检出完整的STR分型, 与嫌疑人一致, 从而比中认定了嫌疑人。