气相色谱法同时测定血清中甲醇、乙醇、正丙醇

引用本文

郝红霞, 杜然, 陈新明, 赵敬真. 气相色谱法同时测定血清中甲醇、乙醇、正丙醇[J]. 刑事技术,2012,37(6): 8-12
HAO Hong-xia, DU Ran, CHEN Xin-ming, ZHAO Jing-zhen. Simultaneous determination of methanol, ethanol and propanol in blood by GC/FID[J]. Forensic Science and Technology,2012,37(6): 8-12 复制到剪切板

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《刑事技术》编辑部

气相色谱法同时测定血清中甲醇、乙醇、正丙醇

郝红霞¹, 杜然¹, 陈新明¹, 赵敬真²

1.中国政法大学,证据科学教育部重点实验室,北京 100040

2.公安部物证鉴定中心,北京 100038

作者简介:郝红霞(1976— ),女,内蒙古人,博士,主要从事毒物分析工作。Tel:010-68645052;E-mail:haohx@126.com

基金: 中国政法大学青年教师学术(创新团队资助项目; 中国政法大学省部级合作项目(No.2011-23210044,2011-23211119)

摘要

目的建立气相色谱同时测定血清中甲醇、乙醇、正丙醇含量的方法。方法改变气相色谱条件,以异戊醇为内标,采用气相色谱-氢火焰离子化检测器对血清直接进行检测。并通过待测组分与内标物的响应值比进行定量。结果 GC/FID法检测血清中的甲醇、乙醇、正丙醇含量,得到了良好的线性关系。乙醇浓度从1~100mg/100mL的线性关系式为Y=0.4145X+0.0232(R²=0.9974)、浓度从100~1000mg/100mL的线性关系式为Y=0.4511X+0.0746(R²=0.9911),甲醇浓度从1~200mg/100mL的线性关系式为Y=0.2778X+0.0493(R²=0.9983)。结论该方法操作简便快速,重现性好,通过检测正丙醇还可以推断腐败血样自身产生的乙醇量,是一种较为理想的血醇检测方法。

关键词: 甲醇; 乙醇; 正丙醇; 血清; 测定

中图分类号:DF795.1 文献标志码:A 文章编号:1008-3650(2012)06-0008-05

Simultaneous determination of methanol, ethanol and propanol in blood by GC/FID

HAO Hong-xia, DU Ran, CHEN Xin-ming, ZHAO Jing-zhen

Abstract

Objective To develop a method for simultaneous determination of methanol, ethanol and propanol in blood by Gas Chromatography.Methods Conditions of gas chromatography were optimized and then blood serum samples were analyzed quantitatively by GC/FID.Results Linear relations of ethanol were Y=0.4145X+ 0.0232(R²=0.9974)for the concentration ranged from 1 to 100mg/100mL and Y=0.4511X+0.0746(R²=0.9911)for the concentration ranged from 100 to 1000mg/100mL. Linear relation of methanol was Y=0.2778x+0.0493(R²=0.9983)for the concentration ranged from 1 to 200mg/100mL.Conclusion This method can be applied in clinical diagnosis of poisoning and forensic analysis of alcohol in blood.

Keyword: Methanol; Ethanol; Propanol; Serum; Detection

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乙醇(分子式C₂H₆O)俗称酒精, 是酒的主要成分, 乙醇进入空胃后, 可于30min~90min内在胃及肠道内被完全吸收入血, 15min~90min内, 血液中酒精浓度值( blood alcohol concentration, BAC )可达到峰值^{[ 1 ]} 。其代谢主要是在肝脏内被氧化分解, 少部分以原形经呼吸道、尿、汗直接排出体外。过量饮用含酒精类饮料不仅可引起心脑血管、消化、神经系统等多种病症, 还可致驾驶员酒后动作失常、判断思维能力下降, 成为诱发道路交通事故的主要原因之一。据相关部门统计2001年中国酒后驾车造成的死亡人数占到了道路交通事故总死亡人数的30%以上^{[ 2 ]} 。以BAC值作为酒后驾驶和醉酒程度的判定依据, 已广泛为交警等执法部门采用并被多个省市纳入道路安全地方性标准。早期由于科技不发达, 采用的多是化学法^{[2, 3]}进行检测, 随之迅猛发展的是气相色谱法, 有顶空气相色谱法^{[4, 5, 6]}, 标准曲线色谱法^{[7, 8, 9]}, 直接进样色谱法^{[10, 11, 12]}, 酶检测法^{[13, 14, 15, 16]}, 分析仪器检测法^{[17, 18, 19]}等。本文建立的气相色谱同时测定血清中甲醇、乙醇、正丙醇含量的方法, 是一种较为理想的血醇检测方法, 报道如下。

1 材料和方法

1.1 仪器

TP2100气相色谱仪, 配有火焰离子化检测器和色谱数据工作站。

1.2 试剂

空白抗凝血, 甲醇、乙醇、正丙醇、异戊醇(内标)储备液配制, 所用标准均为优级纯, 采用重蒸馏水或去离子水。

1.3 色谱条件

色谱柱:DM-WAX30m× 0.25mm× 0.25μ m弹性石英毛细柱。

进样口温200℃, 检测器温FID 220℃, 柱温95℃(5min)→ 5℃/min→ 110℃(0min)→ 30℃/min→ 220℃(0.5~1min), 载气高纯N₂99.999。

柱流速1mL/min, 恒压, 分流比10:1, 尾吹气 29mL/min; H₂ 30mL/min; 空气 300mL/min。

1.4 储备液配置

用移液器分别准确吸取无水甲醇1.26mL、(相对密度0.7913)无水乙醇1.26mL(相对密度0.7893)、正丙醇1.240mL(相对密度0.8037)于50mL容量瓶中, 异戊醇1.230mL(相对密度0.8110)于250mL容量瓶中, 用重蒸水稀释至刻度, 混匀, 分别得浓度为20.0mg/mL的甲醇、乙醇、正丙醇标准储备液, 4.0mg/mL异戊醇标准储备液, 置4℃冰箱保存(可保存1年)。

1.5 醇混标溶液的配制

1.5.1 甲醇、乙醇、正丙醇混标液准确吸取甲醇储液1.00mL, 乙醇储液1.00mL, 正丙醇储液0.50mL同于10mL容量瓶中, 加去离子水至刻度混匀, 即得甲醇2.0mg、乙醇2.0mg、正丙醇1.0mg/mL混合标准溶液。使用期3个月。临用时将该混标液按比例稀释10倍后, 得浓度甲醇0.2mg、乙醇0.2mg、正丙醇0.1mg/mL混标液, 供仪器的定性分析用。

1.5.2 含内标异戊醇的醇混标液准确吸取4.0mg/mL异戊醇储备液1.0mL于10mL容量瓶中, 加去离子水至刻度, 混匀后得0.4mg/mL异戊醇内标液(使用期1个月)。准确吸取甲醇0.2mg、乙醇0.2mg、正丙醇0.1mg/mL混标液200μ L, 加0.4mg/mL。异戊醇内标液800μ L混匀获得。本混标液供考查仪器的稳定性和灵敏度使用, 临用时配制。

1.6 定量曲线标液系列的配制

1.6.1 甲醇0.2~2.0mg/mL和乙醇0.1~1.0mg/mL混合标准系列 (1)甲醇、乙醇单一标准液:准确量取甲醇、乙醇储备液一定量, 用去离子水稀释后获得甲醇4.0mg/mL和乙醇2.0mg/mL的备单标液。

(2)混标系列配制:取5mL的容量瓶6个, 从低浓度到高浓度编号后备用。分别吸甲醇4.0mg/mL和乙醇2.0mg/mL单标液各一定量于系列容量瓶中, 最后用去离子水至刻度混匀后备用, 各系列浓度所需甲醇、乙醇单标液体积见表1。

(3)0.4mg/mL异戊醇内标液:取4.0mg/mL异戊醇储备液一定量稀释10倍获得, 临用时稀释。

表1 甲醇、乙醇混标系列

(4)各标准系列仪器分析试样制备:准确吸取各标准系列200μ L, 加0.4mg/mL异戊醇内标液800μ L混匀, 备检做标准曲线。

1.6.2 乙醇1~10mg/mL和正丙醇0.8~4mg/mL混标系列 (1)乙醇和正丙醇单标液准备:直接用20mg/mL乙醇单标储备液和20mg/mL正丙醇单标储备液配制。

(2)混标系列配制:取5mL的容量瓶6个, 从低浓度到高浓度编号后备用。分别取乙醇20mg/mL和正丙醇20mg/mL单标储备液一定量于系列容量瓶中, 最后加去离子水至刻度混匀后备用。各系列浓度所用乙醇和正丙醇单标液见表2。

表2 乙醇、正丙醇混标系列

(3)0.4mg/mL异戊醇内标液:配制方法见1.6.1。

(4)各标准系列仪器分析试样制备:准确吸取各标准系列200μ L, 加0.4mg/mL异戊醇内标液800μ L混匀, 备标作标准曲线。

1.7 检血试样的制备

1.7.1 检血取送检血样1~2mL, 于3000r/min下离心5min, 上清液备用。

1.7.2 配样准确吸取检血离心5min后的上清液200μ L于1~2mL的试管中, 加0.4mg/mL异戊醇内标液800μ L, 混匀后供仪器分析。每一个检材必须配制2~3份试样, 求各试样的定量数据的平均值作为检材的定量值。

1.7.3 空白血添加乙醇试样的制备取加过抗凝剂的空白血4.0mL, 加入20mg/mL乙醇储备液1.0mL, 轻摇混匀30min以上得血中乙醇浓度4.0mg/mL添加标准血样。取该血样一定量配制成0.20, 0.50, 0.80mg/mL乙醇浓度血样。

取上述0.2, 0.5, 0.8mg/mL乙醇浓度血样于3000r/min离心5min, 上清液取200μ L, 加入800μ L(0.4mg/mL)异戊醇内标液混匀供仪器分析, 以准确定量检材中乙醇用量。添加血试样必须做2份以上重复, 以保证定量数稳定。

2 方法

2.1 进样

设定乙醇优化后的分析条件, 待仪器处在Ready状态时, 连续进样乙醇0.2mg、甲醇0.2mg、正丙醇0.1mg/mL混标液, 考查仪器灵敏度状态和稳定性, 一般进行3~4次重复考量。之后再以乙醇0.5mg、甲醇0.5mg、正丙醇0.2mg/mL混标液200μ L, 加入800μ L 0.4mg/mL异戊醇内标液混匀制成的试样, 进样3~4次, 依各醇与内标的峰面积比值是否一致考查仪器的稳定状态。

2.2 标准曲线的制作

当仪器处于优化后的最佳状态时, 将配制好的标准系列依次分析, 每次进样1μ L, 每个试样进样2~3次, 以甲醇、乙醇、正丙醇各自浓度下的峰面积与内标峰面积比值的平均值为纵坐标, 以绘制该醇的浓度为横坐标, 绘制各定量醇的标准曲线。

2.3 检材血样分析

2.3.1 定性和粗定量仪器在优化稳定状态, 取检血试样1μ L进样, 每个试样进样2~3次。计算检血中可疑组分的Rt值平均值, 与标准的Rt值作比较, 以Rt值的一致性定性。求出检血中乙醇与内标物异戊醇的峰面积比值平均值, 查曲线计算出检血中乙醇的浓度。其他甲醇或正丙醇含量依次类推。

2.3.2 准确定量根据查标准曲线获得的检血中乙醇的浓度, 配制相应浓度的添加血样后制成仪器分析试样, 再经仪器分析、统计, 计算得出检血中乙醇的标准定量数据。

2.3.3 定量计算公式 W_乙醇=A_检/A_添× C_标, 式中:W_乙醇为检血中乙醇的浓度(mg/mL), A_检指检血中乙醇与内标异戊醇的峰面积比值, A_添指空白添加血中乙醇与内标异戊醇的峰面积比值, C_标为空白添加血中乙醇的浓度(mg/mL)。

相对相差计算公式如下:

$相对相差 (%) = \begin{matrix} \frac{| C_{1} - C_{2} |}{C} \end{matrix} \times 100$

式中:C₁、C₂为两份检材平行定量结果, C为两份检材平行定量结果的平均值, 即: $\begin{matrix} \frac{(C_{1} - C_{2})}{C} \end{matrix}$

3 结果与讨论

3.1 线性关系

各标准的保留时间参考值及定量曲线见表3及图1~图4。乙醇的定量限为0.10mg/mL。

表3 各醇在GC/FID上的Rt值

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	图1 4种醇的分GC/FID分离图

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	图2 低浓度乙醇的定量曲线

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	图3 高浓度乙醇的标准曲线

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	图4 甲醇标准曲线

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	图5 正丙醇标准曲线

3.2 定性定量结果判定

3.2.1 定性 (1)检血中未见乙醇或甲醇的色谱峰, 而见内标物的色谱峰, 而且内标物的色谱峰的峰面积值与往常相近, 说明仪器状态正常, 可判定检血中不含甲醇或乙醇成分。(2)以异戊醇为内标, 计算色谱峰的相对保留时间, 与乙醇或甲醇对内标物异戊醇的相对保留时间比较, 误差小于2%时, 可以确定检材中含乙醇或甲醇; 大于2%时不可认定。(3)如果检血试样中未出现内标物色谱峰或峰面积值不近似于往常, 检验结果无效, 应检查原因, 重新检验。(4)本方法检测血液中检出限:甲醇、乙醇均为0.05mg/mL, 检材中乙醇含量低于10mg/100mL时, 建议不给出定性定量数据, 检验结果判为阴性。

3.2.2 定量 (1)检材血应平行制样, 测2份以上, 2份检材试样定量数据的相对相差不得超过10%, 定量结果的报出以2份试样定量数据平均值为准。超过10%相对相差的定量结果不准确, 需重新定量。

(2)本方法采用血样直接进样方法检验甲醇和乙醇, 因此, 必须考虑送检血样是否加抗凝剂。加入抗凝剂的检材血样可以直接报告定量结果。未加抗凝剂的检血样定量结果代表着检血中血清中的血醇浓度, 不能代表全血的浓度。根据人体中血清占全血的比例约在60%左右, 因此报出血醇定量结果应在定量数据上乘以80%的系数, 使血醇的浓度更加接近全血浓度。

3.3 腐败血中乙醇的判定

(1)血液腐败可生成乙醇, 因此在测定腐败血时注意:腐败血生成乙醇的同时, 也平行的生成正丙醇, 因此检血中检出乙醇, 而未检出正丙醇者, 此时检出的乙醇可以认为非血液腐败产生的乙醇。

(2)腐败血液中检出乙醇的同时, 也检出正丙醇, 此时对血液中乙醇含量评判为:第一, 血液中乙醇的含量在正丙醇含量的20倍以下, 此时应考虑为血中乙醇由腐败而产生, 判为阴性。第二, 血中乙醇的含量高于正丙醇含量20倍以上, 此时则认为血中乙醇由血液腐败和非血液腐败两部分组成, 非血液腐败的乙醇含量计算, 可将检出乙醇的浓度值减去相当20倍正丙醇浓度的乙醇浓度值, 余下值则是血中乙醇浓度的下限值。

3.4 定量结果的不确定度

中国交通法规给出20mg/mL酒后驾车和80mg/mL醉酒驾车的评判阈值。因此当定量结果血中浓度为0.2mg/mL和0.8mg/mL附近值时, 必须给出定量结果的不确定度值。所以, 在收到检测血醇含量的检材后应立即实施检验, 以保证血中乙醇含量检测的真实性。

3.5 实验室能力验证结果评价

本实验室已经连续两年参加酒精的实验室能力验证活动, 均取得满意的评价。能力验证(Proficiency Testing)是利用实验室间比对来判定实验室和检查机构能力的活动, 也是认可机构加入和维持国际相互承认协议(MRA)的必要条件之一。以2011年为例, 能力验证提供方提供两个待测血样, 要求对血液中的乙醇含量进行检测。依照上述方法, 本实验室就两个待测组分进行检测, 并监控正丙醇的含量, 以确保精确的测量乙醇, 得到验证方的反馈结果见表4:

表4 实验室能力验证结果评价

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[1]	白璐, 廖林川, 颜有仪, 等. 乙醇相关问题的综合探讨[J]. 刑事技术, 2004(2): 25-27. [本文引用:1]
[2]	李世杰, 郑雯, 冯其光. 血液中乙醇浓度检测方法[J]. 预防医学情报杂志, 2007, 23(1): 124-126. [本文引用:2]
[3]	左保林. 人血中乙醇含量的分光光度法检测[J]. 刑事技术, 1995(2): 12-13. [本文引用:1]
[4]	金念祖, 赵人玲, 戴建国, 等. 顶空气相色谱法同时测定血中乙醇和乙酸基[J]. 南京医科大学学报, 1994, 14(2): 146-148. [本文引用:1]
[5]	雷红伟, 高铁祥, 田先翔, 等. 顶空气相色谱法测定小鼠血液中乙醇的浓度[J]. 湖北中医学院学报, 2007, 9(2): 37-38. [本文引用:1]
[6]	周枝凤, 陈凌云, 沈梅, 等. 自动顶空-气相色谱-质谱法测定血液中乙醇含量[J]. 理化检验-化学分册, 2010, 46(1): 22-24. [本文引用:1]
[7]	黄诚, 卢丽明, 刘国平. 内标法和外标法测定血液中乙醇含量的比较分析[N]. 生命科学仪器, 2008, (3). [本文引用:1]
[8]	贺东霞. 内标曲线法测定血中乙醇含量的优势[J]. 中国卫生工程学, 2010, 9(2): 142-144. [本文引用:1]
[9]	刘军生, 杜书明, 钱义. 血清中甲醇和乙醇的气相色谱法测定[J]. 中国劳动卫生职业病杂志, 2005, 23(1): 69-70. [本文引用:1]
[10]	罗赟, 岳蕴瑶, 李大春. 血液中乙醇含量测定方法的研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2010, 20(8): 1897-1898. [本文引用:1]
[11]	Gary M. Pollack, Jodi L. KawAagoe. Determination of methanol in whole blood by capillary gas chromatography with direct on-column injection[J]. Journal of Chromatography, 1991, 570: 406-411. [本文引用:1]
[12]	周华芳, 胡勇, 王凤, 等. 直接进样毛细管柱气相色谱法快速测定全血中乙醇含量[J]. 中国卫生检验杂志, 2007, 17(9): 1568-1569. [本文引用:1]
[13]	王向阳. 乙醇氧化酶法测定血清中乙醇含量[J]. 临床检验杂志, 2002, 20(4): 208-210. [本文引用:1]
[14]	伏建峰, 史清海, 路西春, 等. 乙醇脱氢酶法测定血浆中乙醇[J]. 西北国防医学杂志, 2005, 26(5): 345-347. [本文引用:1]
[15]	胡云良, 刘晓琴, 沈财成, 等. 乙醇氧化酶两点速率法测定血清微量乙醇[J]. 中国卫生检验杂志, 2006, 16(9): 1054-1056. [本文引用:1]
[16]	胡云良, 王慧燕, 张立, 等. 改良乙醇脱氢酶法测定血清中微量乙醇[J]. 中国卫生检验杂志, 2008, 18(1): 47-49. [本文引用:1]
[17]	彭又生, 蔡平金, 陈思颖, 等. 多层膜干片法测定血清酒精浓度的方法学探讨[J]. 现代预防医学, 2007, 34(7): 1341-1343. [本文引用:1]
[18]	周方满, 赵笔辉, 吴建平, 等. 干化学法检测血乙醇浓度的影响因素分析[J]. 现代实用医学, 2010, 22(12): 1347-1348. [本文引用:1]
[19]	Hitoshi Biwasaka, Takuya Tokuta, Yoshitoshi Sasaki, et al. Application of quantitative ethanol detector(QED)test kitto measure ethanol concentration in blood samples[J]. Forensic Science International, 2001, 124: 124-129. [本文引用:1]

2004

0.0

白璐, 廖林川, 颜有仪, 等. 乙醇相关问题的综合探讨[J]. 刑事技术, 2004(2): 25-27.

本文探讨了乙醇的体内过程、乙醇造成的疾病及行为异常、酒后驾车以及血液中酒精浓度的检测方法等相关的热点和难点问题,提出了可供参考的观点和意见.

... 乙醇(分子式C₂H₆O)俗称酒精, 是酒的主要成分, 乙醇进入空胃后, 可于30min~90min内在胃及肠道内被完全吸收入血,15min~90min内,血液中酒精浓度值( blood alcohol concentration,BAC )可达到峰值^{[ 1 ]} ...

2007

0.0

李世杰, 郑雯, 冯其光. 血液中乙醇浓度检测方法[J]. 预防医学情报杂志, 2007, 23(1): 124-126.

就国内报道的血液中乙醇浓度检测常用方法,包括化学法、酶法、气相色谱法等方法的原理、优缺点作以介绍和评价.

... 据相关部门统计2001年中国酒后驾车造成的死亡人数占到了道路交通事故总死亡人数的30%以上^{[ 2 ]} ...

... 早期由于科技不发达,采用的多是化学法^[2,3]进行检测,随之迅猛发展的是气相色谱法,有顶空气相色谱法^[4,5,6],标准曲线色谱法^[7,8,9],直接进样色谱法^[10,11,12],酶检测法^{[13,14,15,16]},分析仪器检测法^[17,18,19]等 ...

1995

0.0

左保林. 人血中乙醇含量的分光光度法检测[J]. 刑事技术, 1995(2): 12-13.

本文介绍用分光光度法检测乙醇在0～600μl/100ml人血中浓度范围内的含量测定,具有简便、快速、检材用量少的特点,已成功地应用于多起案件的检验。

1994

0.0

金念祖, 赵人玲, 戴建国, 等. 顶空气相色谱法同时测定血中乙醇和乙酸基[J]. 南京医科大学学报, 1994, 14(2): 146-148.

用顶空气相色谱法同时测定了大白鼠血液中乙醇和乙酸基的含量，在测定前，先用高氯酸试剂除去血样中蛋白质，并对乙酸基作甲酯比处理。本方法简便、快速、灵敏，适用浓度范围广，有良好的精密度（乙醇和乙酸基的ＣＶ分别为３．６％和５．２％）和准确度（乙醇和乙酸基的回收率分别为９６．４％和９５．０％）。

2007

0.0

雷红伟, 高铁祥, 田先翔, 等. 顶空气相色谱法测定小鼠血液中乙醇的浓度[J]. 湖北中医学院学报, 2007, 9(2): 37-38.

目的建立测定小鼠血液乙醇的浓度的灵敏方法 .方法取仲丁醇标液1ml和血样0.25ml放入顶空瓶中,用内衬聚四氟乙烯膜的硅垫密封,置电热恒温器中60℃加热平衡30min,气相色谱仪测定小鼠血液的乙醇浓度.结果校正因子Fi/Fs的平均值为3.686,平均偏差为2.15%.结论本方法是测定血液乙醇浓度简便、灵敏、有效的方法 .

2010

0.0

周枝凤, 陈凌云, 沈梅, 等. 自动顶空-气相色谱-质谱法测定血液中乙醇含量[J]. 理化检验-化学分册, 2010, 46(1): 22-24.

摘　要：提出了自动顶空-气相色谱-质谱联用检测血液中乙醇含量的方法。取一定量的血样或乙醇标准样品置于顶空瓶中（其中各加固定量的叔丁醇作为内标）,在60 ℃及中速振摇的条件下平衡20 min,通过进样环定量地将一定量样品引入于气相色谱-质谱联用仪器中进行测定。乙醇和叔丁醇的保留时间分别为1.47 min和1.56 min。方法的线性范围为0.01-10.00 g·L-1,检出限（3S/N）为0.6 mg·L-1,测定下限（10S/N）为1.0 mg·L-1。乙醇的回收率在92%-105%之间,测定值的相对标准偏差（n=6）小于7%。

2008

0.0

黄诚, 卢丽明, 刘国平. 内标法和外标法测定血液中乙醇含量的比较分析[N]. 生命科学仪器, 2008, (3).

[目的 ]比较内标定量法和外标定量法在测定血液中乙醇含量的差异。[方法]运用顶空气相色谱法对血液样品进行分析,然后分别采用内标法和外标法计算其乙醇含量。 [结果]内标法的准确度和精密度均优于外标法,内标法和外标法之间无显著性差异。[结论]顶空气相色谱法分析血中乙醇,采用内标法和外标法的定量方式获得的结果均能满足检测要求。分析人员可根据实际情况尤其是实验室条件而使用相应的定量方式。

2010

0.0

贺东霞. 内标曲线法测定血中乙醇含量的优势[J]. 中国卫生工程学, 2010, 9(2): 142-144.

摘　要：目的建立气相色谱内标曲线法检测血中乙醇含量,探讨该方法的优势。方法用6%高氯酸沉淀分离全血样品,然后分别用内标曲线和标准曲线法计算其乙醇含量,并进行对比。结果内标曲线法的相关系数〉0.999 9,高低浓度待测样品检测结果的RSD分别为1.3%和0.8%,回收率为98.2%-103.6%;标准曲线法的相关系数〉0.998 5,检测结果的RSD分别为4.9%和2.4%,回收率为108.7%-126.5%。结论内标曲线法比传统的标准曲线法样品处理更简单,数据重现性好,结果准确、可靠,是一种理想的分析方法。

2005

0.0

刘军生, 杜书明, 钱义. 血清中甲醇和乙醇的气相色谱法测定[J]. 中国劳动卫生职业病杂志, 2005, 23(1): 69-70.

目的建立血清中甲醇、乙醇快速测定的气相色谱方法.方法抽取静脉血10ml,取10ml静脉血,待血液凝固后离心分离血清,取1.0μl血清直接进样,采用玻璃填充柱分离样品中的甲醇和乙醇,外标法定量.结果血清中甲醇、乙醇最低检出浓度均为0.50μg/ml,线性范围分别为0.005～0.400和0.10～3.95 mg/ml,回收率分别为98.0%～102.0%和98.0%～103.7%.相对标准偏差(RSD)分别为2.00%～6.37%和3.18%～5.83%.结论血清中甲醇、乙醇的气相色谱测定方法能将甲醇和乙醇很好分别测定,可应用于甲醇、乙醇中毒的临床诊断和治疗.

2010

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罗赟, 岳蕴瑶, 李大春. 血液中乙醇含量测定方法的研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2010, 20(8): 1897-1898.

摘　要：目的：建立快速检测人血液中乙醇的气相色谱测定方法。方法：血液用水稀释后采用GDX- 103玻璃填充柱-FID检测器测定,以保留时间定性,峰面积（或峰高）外标法定量。结果：在最佳分析条件下,血液中乙醇在10μg/ml～200μg /ml范围内有良好的线性关系（r〉0.99）。方法最低检出限为5μg/ml。方法的回收率为92.9%,精密度RSD为4.17%～7.22%。结论：该法测定人血液中乙醇快速、简便、灵敏,结果准确可靠。

1991

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2007

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周华芳, 胡勇, 王凤, 等. 直接进样毛细管柱气相色谱法快速测定全血中乙醇含量[J]. 中国卫生检验杂志, 2007, 17(9): 1568-1569.

目的:建立一种直接进样毛细管柱气相色谱法快速测定全血中乙醇含量的方法.方法:用内标法,5%偏磷酸作沉淀剂,血样离心后,样品直接进入毛细管柱气相色谱测定乙醇的含量.计算全血中的乙醇含量,评价本方法的准确度、精密度、线性范围.结果:在该色谱条件下能完全分离乙醛、甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、叔丁醇、正丙醇、正戊醇和异戊醇;血中乙醇浓度线性方程为Y=1.639X-0.0103,r=0.9965,线性范围为10～100 mg/100 ml,最低检出限为0.1 mg/100 ml,日内精密度≤3.0%,日间精密度≤7%,回收率为101.7%.结论:本法具有快速、准确、灵敏度高、操作简便等优点,可应用于酒精中毒的诊断.

2002

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王向阳. 乙醇氧化酶法测定血清中乙醇含量[J]. 临床检验杂志, 2002, 20(4): 208-210.

目的：建立血清中测定乙醇浓度的的乙醇氧化酶法。方法：基于乙醇氧化酶氧化乙醇产生乙醛和H2O2，偶联Trinder反应生成醌亚胺，可在500nm波长比色测定，通过优化反应体系中各主要成分和测定条件，建立了本法。结果：本法的灵敏度0．5g/L时，A500nm,1cm＞0．08／线性范围0．125－5．0g/L；批内CV为1．02％，批间CV为2．76％；本法（Y）与气相色谱法（X）比较；Y＝1．06X＋0．12，γ＝0．989。结论：本法的灵敏度较高、线性范围宽、精密度和准确性均较好，适合临床实验室急诊测定用。

2005

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伏建峰, 史清海, 路西春, 等. 乙醇脱氢酶法测定血浆中乙醇[J]. 西北国防医学杂志, 2005, 26(5): 345-347.

目的:建立一种快速测定血浆中乙醇浓度的新方法.方法:选用三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸(Tris-HCL)作为缓冲体系,在碱性条件下,乙醇脱氢酶(ADH)催化乙醇转化成乙醛,同时生成还原型辅酶I (NADH).在340 nm波长处检测吸光度的变化,对照标准计算乙醇的浓度.结果:ADH最适用量为753 KU/L,辅酶I(NAD+)最适浓度为60.0 mmol/L,检测过程仅需90 s,线性范围可达0～68.60 mmol/L,变异系数(CV)为2.31%～3.25%,回收率为98.4%～101%,与美国DADE试剂盒比较具有良好的相关,γ=0.985,y=0.987x+0.024. 结论:本法测定血浆中乙醇无需除蛋白,具有快速、简便等优点,可用于自动生化分析仪及手工操作,适于临床常规运用.

2006

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胡云良, 刘晓琴, 沈财成, 等. 乙醇氧化酶两点速率法测定血清微量乙醇[J]. 中国卫生检验杂志, 2006, 16(9): 1054-1056.

目的:建立一个灵敏、准确、特异、试剂稳定的乙醇氧化酶法用于测定血清微量乙醇浓度.方法:利用乙醇氧化酶与过氧化物酶偶联,通过优化反应体系及自动生化分析仪分析参数,采用两点速率法对乙醇进行分析.结果:乙醇浓度在2 000 mg/L以下线性良好;批内RSD小于2.81%,批间RSD小于4.51%;平均回收率为100.7%;本法(Y)与气相色谱法(X)比较具有良好的相关性,Y=0.996X+3.58,r=0.981.胆红素159.1 μmol/L、甘油三酯14.31 mmol/L、血红蛋白5.8g/L以下对本法测定乙醇结果无干扰.结论:建立的两点速率法测定乙醇灵敏度高、准确度、特异性均较好,特别适合于血清乙醇浓度处于轻度超标的疑似酒后者的标本检测.

2008

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2007

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彭又生, 蔡平金, 陈思颖, 等. 多层膜干片法测定血清酒精浓度的方法学探讨[J]. 现代预防医学, 2007, 34(7): 1341-1343.

[目的]了解多层膜干片法测定血清酒精浓度的试验特点.[方法]采用多层膜干片法测定血清酒精浓度,并对其方法学进行初步研究.[结果]批内重复性实验的平均变异系数为1.91%;批间重复性实验的平均变异系数为2.12%;平均回收率为102.00%;线性达290mg/dl(Y=0.97X-2.45,r=0.997);加入胆红素＜342.08μmol/L,血红蛋白＜5g/L,甘油三酯＜18.08mmol/L无显著干扰.该法与免疫荧光偏振法测定结果呈高度相关,r为0.998.[结论]本方法结果重复性好,线性范围宽,准确,快速,适合临床应用.

2010

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周方满, 赵笔辉, 吴建平, 等. 干化学法检测血乙醇浓度的影响因素分析[J]. 现代实用医学, 2010, 22(12): 1347-1348.

目的观察血常见成分对干化学法测定血酒精浓度的影响.方法采用EP7-A2评价血红蛋白、结合胆红素、甘油三酯、甲醇和乳酸锂等对血酒精浓度测定的干扰,并观察干扰成分的剂量效应.结果血清中的胆红素≤342μmol/L、甲醇≤0.7mg/L及乳酸锂≤6.6mmol/L时,不影响对血酒精测定;血红蛋白≥5g/L、甘油三酯≥37mmol/L时可使血酒精测定结果升高.结论严重溶血、高浓度甘油三酯干扰干化学法测定血酒精浓度,但黄疸、甲醇、乳酸锂等无干扰.

2001

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