作者简介:水晶晶(1987—),女,湖北随州人,在读硕士研究生,主要从事痕迹检验研究。Tel: 18911133187;E-mail:shuijingjing0520@163.com
目的 建立一种酸性黄显现非渗透性客体上血潜手印的方法。方法 制备白色瓷砖、黑色塑料袋、黑色瓷瓶、易拉罐侧面、深色铁质茶叶盒等为客体的捺印手印,配置以酸性黄作为主要成分的染色剂,对其进行固定、染色、漂洗,在多波段光源下观察。结果 在440nm激发光源条件下,通过橙色护目镜观察有很强的黄色荧光特征。结论 酸性黄显现法具有操作简单、显现效果明显、能排除深色背景干扰的特点,容易推广使用。
Objective To introduce a new method to develop blood fingerprints on no-porous surface by a protein dye.Methods Blood fingerprints deposited on ceramic tile, black plastic bag, ring-pull can were developed with Acid Yellow 7, and observed under alterative light source.Results Viewed through the orange goggles, the blood fingerprints developed by acid yellow 7 exhibited yellow colour under the natural light and photoluminescence with excitation of 440 nm light.Conclusion This method is easy to operate and effective.
指纹作为一种可靠的人身识别方法由来已久, 显现潜在手印的方法也有许多。血潜手印是刑事案件现场常见的痕迹, 在犯罪现场经常会遇到玻璃、瓷砖、瓷瓶、黑色塑料袋、易拉罐等与案件有关的非渗透性客体, 显现此类非渗透性客体上的潜在手印对于案件的侦破有不可忽视的作用。目前国内通过蛋白质染色显现非渗透性客体上遗留的血潜手印主要用氨基黑10B方法。血潜手印的主要成分是血浆和血细胞(红、白、血小板)组成, 有80%以上的水和蛋白质、氨基酸等含氮或非氮有机物及无机盐类。
蛋白质是由氨基酸经多步缩合反应而形成的复杂大分子, 其分子中有大量的氨基和羧基, 这些氨基和羧基保持着各自的化学特性, 前者可以和酸反应使蛋白质分子带正电荷, 而后者却可以和碱发生反应使得蛋白质分子带上负电荷。即使在中性环境中, 其自身的氨基和羧基也可以反应形成不同部位带不同电荷的电荷分布形态。氨基黑10B的结构中存在磺酸根(负离子形态), 在弱酸环境中可与蛋白质分子中带正电的氨基结构结合而吸附, 使蛋白质表面有大量的染料分子沉积, 从而将蛋白质痕迹呈染料颜色显出[1, 2]。
氨基黑10B染料的颜色为蓝黑色, 因此显现出的血潜手印呈蓝黑色。在浅色客体上, 蓝黑色血潜手印与背景对比强烈, 能很好地观察到效果, 然而当背景颜色为深色时, 背景与手印的颜色反差减弱, 氨基黑10B的显现效果就不明显了。由于氨基黑10B显现法的这一局限性使得显现深色客体上血潜手印成为亟需解决的一大难题, 本文针对该问题进行了初步研究, 尝试用酸性黄显现不同非渗透性客体上的指纹, 报道如下。
酸性黄(Acid Yellow 7), 又称C.I.酸性黄3、亮磺胺五羟黄酮。分子式为C19H13N2NaO5S, 分子量为404.37, 熔点≥ 100℃, 相对密度为5kg/m3~800kg/m3, 无毒, 易溶于水, 黄色粉末, 化学结构式[3]见图1。
比较酸性黄和氨基黑10B的结构式可以看出, 二者具有类似的化学基团如氨基和磺酸基, 均与蛋白质具有很好的亲和力, 能够发生吸附反应[4]。酸性黄是一种灵敏的蛋白质染色剂, 其显现血潜手印的原理是:酸性黄与血潜手印中蛋白质发生反应, 从而显出手印。血潜手印中的蛋白质与酸性黄发生反应后生成的物质在自然光下呈黄色, 并且在多波段光源观察下会发出强烈的荧光。对于深色客体上的血潜手印, 强烈的荧光特征能够减弱背景干扰, 增强手印纹线与背景之间的反差。因此, 酸性黄这一特性是氨基黑10B无法比拟的。
用手指沾取新鲜血液(6个月以内)分别在白色瓷砖、黑色塑料袋、黑色瓷瓶、易拉罐侧面、深色铁质茶叶盒上捺印手印若干。将血液用蒸馏水稀释5倍后在黑色塑料袋上捺印手印若干。
准备量筒1个、玻璃皿3个、酸性黄0.5g、5-磺基水杨酸20g、65mL乙酸、325mL乙醇、1910mL蒸馏水、镊子两只、定性滤纸、脱脂棉、电子天平、磁力搅拌器、多波段光源、橙色滤光片、数码相机。
固定液采用5-磺基水杨酸溶液, 用5-磺基水杨酸溶液主要是由于5-磺基水杨酸呈酸性, 能够使血液中的蛋白质发生沉淀反应, 从而将血手印固定下来。染色液主要用乙酸、乙醇、蒸馏水配制, 酸性黄在水中很容易溶解, 乙酸可以提供蛋白质与酸性黄反应的酸性环境[5]。
用电子天平称取20g 5-磺基水杨酸, 用量筒量取1000mL蒸馏水倒入干净、干燥的烧杯, 将20g 5-磺基水杨酸溶于蒸馏水并用磁力搅拌器搅拌至充分溶解, 此为固定液。再用电子天平称取0.5g酸性黄, 用量筒量取350mL蒸馏水倒入干净、干燥的烧杯, 将0.5g酸性黄溶于蒸馏水并用磁力搅拌器搅拌至充分溶解, 用量筒量取25mL乙酸、125mL乙醇(无先后顺序)缓慢倒入后混合均匀, 此为染色液。最后用量筒分别量取40mL乙酸、200mL乙醇、560mL蒸馏水在干净、干燥的烧杯中混合均匀, 此为漂洗液。
配方如下(值得说明的是:本配方是初步研究得出的, 下一步将会对溶液浓度和溶剂条件进一步改良后得出更好的实验效果):
固定液:5-磺基水杨酸 20g
蒸馏水 1000mL
染色液: 酸性黄 0.5g
乙醇 250mL
冰醋酸 10mL
蒸馏水 350mL
漂洗液: 乙酸 40mL
乙醇 200mL
蒸馏水 560mL
(1)固定血手印样本:将配制好的固定液倒入玻璃皿中。将捺印有血手印的黑色塑料袋、展开的易拉罐侧面、深色铁质茶叶盒浸泡在固定液中5min以上, 取出晾干; 对于体积较大的白色瓷砖、黑色瓷瓶则使用定性滤纸浸泡在固定液中再贴附在留有血潜手印的部位, 并用脱脂棉沾取固定液涂抹在定性滤纸上, 保持滤纸湿润5min以上, 揭去滤纸, 将检材晾干。
(2)对血手印进行染色:将配制好的染色液倒入玻璃皿中。将固定好的捺印有血手印的黑色塑料袋、展开的易拉罐侧面、深色铁质茶叶盒浸泡在染色液中3min左右取出; 对于体积较大的白色瓷砖、黑色瓷瓶、深色铁质茶叶盒则采用(2)中固定样本的方法进行染色操作。染色时间为3min左右。
(3)漂洗:将配制好的漂洗液倒入玻璃皿中。染色后的样本在漂洗液中反复漂洗。不同客体的操作方法同(2)(3)所述。
(4)将样本取出晾干后置于自然光下进行观察, 并用数码相机拍照固定。
(5)将实验所得的样本置于多波段光源下观察, 在440nm光源激发下, 戴橙色红色护目镜进行观察, 发现显现出的手印发出强烈荧光。
(6)用数码相机在440nm光源激发下通过橙色滤光片对样本进行拍照固定。
(1)浅色客体上的血潜手印经酸性黄显现后能观察到黄色的手印纹线, 置于多波段光源下(激发光源440nm, 戴橙色护目镜观察)呈现很强的荧光特征(见图2)。在自然光下纹线较弱的手印, 多波段光源下(激发光源440nm, 戴橙色护目镜观察)也能有很好的观察效果。
(2)深色客体上的血潜手印, 用酸性黄显现前基本观察不到手印纹线, 显现后, 通过打光可以观察到微弱的纹线特征。当置于多波段光源下(激发光源440nm, 戴橙色护目镜观察)时, 手印荧光强度强, 纹线完整、清晰, 对于如易拉罐、茶叶盒上的复杂背景干扰也能起到很好的减弱作用(见图3~图6)。
(3)用蒸馏水稀释5倍后的血液捺印的手印样本用酸性黄显现后基本观察不到手印纹线, 置于多波段光源下依然可以观察到纹线特征(见图7)。
本实验结果显示, 酸性黄可以作为一种检测蛋白质的荧光类试剂使用。但本文仅对酸性黄显现不同非渗透性客体上的血潜手印进行了初步研究, 使用了白色瓷砖、黑色塑料袋、深色易拉罐、黑色瓷瓶、深色铁质茶叶盒作为样本, 并且仅将血液稀释5倍制作样本进行试验。当在其它条件时, 如不同客体上不同血液浓度的血潜手印的显现效果会是如何?因此, 还需要对酸性黄与血潜手印的反应原理进行深入研究, 进一步优化试剂配方、手印的显现条件、操作程序及步骤等。此外, 酸性黄是否适用于渗透性客体也有待下一步的研究。
The authors have declared that no competing interests exist.
[1] |
|
[2] |
|
[3] |
|
[4] |
|
[5] |
|