探讨EOS染色剂对血迹DNA检验的影响
引用本文
刘峰, 李栽儿, 肖斌, 肖鑫磊. 探讨EOS染色剂对血迹DNA检验的影响[J]. 刑事技术,2012,37(3): 31-33
LIU Feng, LI Zai-er, XIAO Bin, et al. DNA test of blood fingerprint treated with fingerprints reagent EOS[J]. Forensic Science and Technology,2012,37(3): 31-33
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LIU Feng, LI Zai-er, XIAO Bin, et al. DNA test of blood fingerprint treated with fingerprints reagent EOS[J]. Forensic Science and Technology,2012,37(3): 31-33
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探讨EOS染色剂对血迹DNA检验的影响
作者简介:刘 峰(1979—),男,河南周口人,主检法医师,硕士学位,研究方向为法医遗传学。Tel:(0755)84468352
摘要
目的 探讨被EOS染色剂处理后的血迹进行DNA检验的初步方法。方法 制备EOS染色剂处理的血迹样本,分别采取纯水擦拭、75%酒精擦拭,或手术刀刮取血痕浸泡于纯水中、75%酒精中,然后提取DNA进行下一步检测。结果 采用刀刮取血痕浸泡于75%酒精中,提取的DNA检测结果较好。结论 初步实验显示,经EOS染色剂处理过的血迹,可参考刀刮取血迹置于75%酒精浸泡后提取DNA做下一步检测。
关键词:
EOS染色剂; DNA提取; 血迹
中图分类号:DF795.2
文献标志码:A
文章编号:1008-3650(2012)03-0031-03
DNA test of blood fingerprint treated with fingerprints reagent EOS
Abstract
Objective To investigate the effect of fingerprint reagent EOS to DNA test and explore methods for testing DNA from blood fingerprints treated with EOS.Methods The blood samples treated by EOS were wiped with water, wiped with alcohol, and scraped with scalpel, then the DAN were analyzed with ABI 3100 Genetic Analyzer and the results were compared.Results STR loci were genotyped successfully in the sample which was scraped and alcohol treated.Conclusion Scraping the samples and then treating with alcohol is the best way to extract DNA from the blood fingerprint treated by reagent EOS.
Keyword:
EOS; DNA test
痕迹检验人员对案件现场的血指纹或者潜血指纹进行显现时, 通常会使用一种EOS染色剂或者类似性质的染色剂[1]。这类染色剂的主要作用是通过结合血红蛋白改变其空间结构, 并结合一些红色或者蓝色的染色物质而显现指纹。所以, 使用抗人血红蛋白试剂条对这些经过染色剂处理过的指纹进行检验时, 由于血红蛋白空间结构的改变而导致呈现阴性结果。并且, 由于该类染色剂溶液含有甲醛等成分, 通常在对血指纹喷洒了该类染色剂溶液之后一段时间, 由于甲醛的固定作用会导致血迹被固定在载体上, 血迹不易被带有超纯水湿润的棉签或者纱线转移下来, 而影响进一步的DNA检验。笔者工作中曾经遇到过经EOS染色剂处理过的血迹检材, 并进行了成功检验[2]。
为进一步确认所使用检验方法的有效性, 本实验有针对性的进行了如下初步试验, 报道如下。
1 材料和方法
1.1 试剂和材料
EOS染色剂购置于北京龙昊公司, Chelex、蛋白酶K购置于Promega公司, Identifiler-Plus扩增试剂盒购置于AB公司; 抽取志愿者静脉血1mL, 75%医用酒精, 抗人血红蛋白试剂条8条, 洁净眼科剪、手术刀片, 洁净棉签, 离心管。
1.2 主要仪器
博迈杰恒温混匀仪(珠海博迈杰公司), 9700型扩增仪(美国AB公司), 3130XL型遗传分析仪(美国AB公司), 移液器(德国Eppendof公司), 高速离心机(德国Eppendof公司), 纯水仪(美国Millipore公司)。
1.3 方 法
1.3.1 检材制备 抽取志愿者静脉血液1mL放置于试管内, 取2μ L血液均匀摊薄涂抹在洁净玻璃板上, 重复该步骤8次。待血迹晾置1h后喷洒EOS染色剂, 再放置30min。制备的8个样本编为1号~8号, 分为4组, 依次每2个号为一组备用。
1.3.2 检材提取 用超纯水浸透棉签2枚, 甩去棉签上吸附的水珠后分别擦拭1号、2号样本, 用眼科剪剪取外层分别放入加有200mL超纯水的离心管。
用75%医用酒精浸透棉签2枚, 甩去棉签上吸附的酒精后分别擦拭3号、4号样本, 剪取外层分别放入加有200mL 75%医用酒精的离心管中。
用手术刀片分别刮取5号、6号样本, 刮下来的碎屑分别放置加有200mL超纯水的离心管中。
用手术刀片分别刮取7号、8号样本, 刮下来的碎屑分别放置加有200mL 75%医用酒精的离心管中。
1.3.3 DNA提取、扩增和电泳 上述1号~8号离心管经涡旋震荡后放置30min, 使用抗人血红蛋白试剂条检测, 均呈阴性反应。使用Chelex-100方法提取上述1号~8号样本中DNA, 分别吸取5μ L上清液用Identifiler-Plus扩增试剂盒和9700型扩增仪进行扩增, 扩增前先7500荧光定量PCR仪定量, 然后用3130XL型遗传分析仪检测。
2 结 果
试验样品定量结果见表1。4组样本经过检验均获得了DNA分型, 检测结果显示第1组样本DNA分型图谱质量最差, 而第4组样本DNA分型分型图谱质量最好。4组样本单号检材检测图谱见图1~图4。
 | 表1 样品定量结果 |
 | 图1 1号样本检测结果(超纯水湿润的棉签擦拭) |
 | 图2 3号样本检测结果(医用酒精湿润的棉签擦拭) |
 | 图3 5号样本检测结果(手术刀片刮擦后的碎屑使用超纯水浸泡) |
 | 图4 7号样本检测结果(手术刀片刮擦后的碎屑使用医用酒精浸泡) |
3 讨 论
在刑事案件的现场勘查中, 尤其是一些如凶杀, 抢劫等恶性刑事案件, 犯罪嫌疑人在加害于受害人的过程中, 往往会导致受害人受伤、出血等情况发生[3]。而犯罪嫌疑人的手指、手掌在此过程中也容易沾染上受害人的血迹, 随后在犯罪嫌疑人的移动过程中可能会在一些载体, 如墙壁、桌椅、车门、窗户等的表面留下血指纹或者潜血指纹。该血迹指纹被痕迹专业人员显现后输入指纹数据库可以进行犯罪嫌疑人的搜查工作, 同时, 形成该指纹的血迹被合适提取后做出DNA分型也可以证明犯罪嫌疑人曾出现在案发现场。甚至在某些时候, 犯罪嫌疑人自己受伤留下了血指纹, 经过DNA检验之后也可以将检验结果输入数据库进行比对, 更增加了一条查找犯罪嫌疑人的途径。
然而, 在实际案件现场勘查中, 发现有类似可疑痕迹时, 通常以能够完整显现指纹为第一步工作, 痕迹检验人员在处理该类痕迹时往往会采用EOS染色剂或者类似性质的染色剂, 以期获得最好的指纹显现效果。但是这样处理之后的痕迹会影响到下一步的DNA检验。
本实验表明, 超纯水湿润的棉签擦拭EOS染色剂或者类似性质的染色剂处理过的痕迹是不可取的, 采取手术刀片刮擦后的碎屑再用医用酒精浸泡的方式得到较好结果。
综上所述, 现场勘查人员在对一些可疑的血指纹痕迹进行处理时要多沟通, 不能只考虑本专业范围内的工作而忽略了其他专业的检验需求, 原始物证检验要尽量选择一种对其他专业进行后续检验影响较小的方法进行[4]。进行DNA检验的工作人员也要了解物证是否被前期处理过, 以决定进一步的检验方法。
The authors have declared that no competing interests exist.
参考文献
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